一、白首乌甙体外对小鼠T淋巴细胞功能影响的研究（论文文献综述）
孙文静[1]（2021）在《地锦多糖的制备及对小鼠免疫增强活性研究》文中指出多糖是中药的重要组成部分,具有增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、等生物活性。多糖作为免疫增强剂对动物疾病具有增强抵抗力的作用。地锦草在我国分布范围广且药理作用广泛,具有显着的抗氧化、抗肿瘤以及抗菌抗炎的功效,有重要的临床应用和开发价值。本研究选择地锦多糖作为研究对象,从提取纯化、结构鉴定、对淋巴细胞免疫活性、对巨噬细胞功能及对小鼠巨噬细胞的抗氧化等方面初步筛选出3个效果较好的活性部位,进一步研究其体内对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。试验Ⅰ地锦多糖的提取纯化采用一步醇沉和分步醇沉法提取粗地锦总多糖(EHPS tc)和各分级多糖EHPS60c、EHPS70c和EHPS80c。然后以脱色率、多糖保留率为指标,采用L25（56）正交设计对双氧水加入量、反应温度、p H值、反应时间等脱色条件进行优选。脱色后EHPStc经DEAE-Sephadex A-25葡聚糖凝胶柱层析,得到纯化的地锦多糖1(EHPStp-1)和地锦多糖2(EHPStp-2),分别用苯酚-硫酸法和考马斯亮兰法测定多糖和蛋白含量。结果表明,EHPStc最优脱色条件为反应温度50℃、反应时间4 h、p H值为2、双氧水加入量4%时,多糖脱色率达到71.10%,保留率为63.31%,多糖含量为74.52%。经柱层析纯化后EHPStp-1糖含量提高为95.36%,EHPStp-2糖含量提高为92.35%。因此可以看出,地锦多糖经过DEAE-Sephadex A-25葡聚糖凝胶柱的洗脱纯化可以显着提高多糖含量;经验证试验发现双氧水脱色工艺有效可行。试验Ⅱ地锦多糖的结构鉴定采用红外光谱法（IR）、紫外光谱法（UVS）、PMP柱前衍生高效液相色谱法（PMP-HPLC）、高效凝胶渗透色谱（HPGPC）法、硫酸咔唑法、刚果红法和核磁共振波谱法（NMR）等方法分析各多糖结构。结果表明,EHPStc和EHPStp-2中可能含有少量蛋白。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2均符合多糖类物质红外光谱基本特征。EHPStp-1主要包括Glc（83.1%）、Gal（6.1%）、Glc UA（1.6%）;EHPStp-2主要包括Gal（25.6%）、Gal UA（22.2%）、Ara（16.6%）;EHPStc主要包括Glc（53.5%）、Ara（16.8%）、Gal（14.3%）。EHPStc和EHPStp-1的重均分子量分别为26.2和26.0 k Da;EHPStp-2重均分子量分别为145.6 k Da和8.9 k Da。EHPStp-1和EHPStp-2的糖醛酸含量分别为15.9%和27.9%。EHPStc和EHPStp-1均具有明显的三螺旋结构。EHPStp-1存在α构型的单糖;EHPStc存在α和β构型的单糖。经结构鉴定,水提醇沉提取物均为多糖,但多糖结构复杂,要得到具体的结构成分还需进一步检测。试验Ⅲ地锦多糖对淋巴细胞免疫活性的影响将EHPS60c、EHPS70c、EHPS80c、EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2加入到小鼠外周血淋巴细胞培养体系中,用MTT法测定其安全浓度;然后取安全浓度范围内6个多糖,分别单独或协同PHA加入到小鼠外周血淋巴细胞中,培养48 h后,测定淋巴细胞增殖(细胞A570值和最高淋巴细胞增殖率)的变化,筛选增强免疫活性的较好部位;将筛选出的3个多糖在31.25μg/m L时刺激淋巴细胞,分别在24 h、48 h和72 h收集细胞处理后,在流式细胞仪上检测各个时间点的周期分布情况和CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的变化;ELISA法测定免疫球蛋白IgA、IgG和细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-r的含量。结果表明,多糖单独刺激时EHPStp-1在15.625μg/m L时的细胞增殖率最高,为15.099%,其次为EHPStp-2在相同浓度时,达到12.129%;多糖与PHA共同刺激时,EHPStc在15.625μg/m L时的细胞增殖率最高,为23.820%;其次为EHPStp-1在31.25μg/m L时,为20.499%。综合评价,筛选出EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2可能是增强免疫活性的较好部位。细胞周期分布结果表明,与EHPStc相比较,EHPStp-1和EHPStp-2处理细胞48 h和72 h后,SPF值和PI值显着升高。EHPStp-1和EHPStp-2处理细胞48 h后,CD4+、CD8+淋巴细胞百分率显着高于EHPStc对照组。EHPStp-1、EHPStp-2和EHPStc均能显着促进IgA、IgG和IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌。说明,地锦多糖能够有效提高小鼠淋巴细胞免疫活性,其中EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2免疫增强活性最强。试验Ⅳ地锦多糖对巨噬细胞功能的影响取安全浓度范围内5个浓度的6个多糖,分别单独或协同LPS加入到培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,培养48 h后,测定巨噬细胞增殖的变化;检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性、NO和iNOS分泌;ELISA法测定细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ、MCP-1、MIP-1?的含量;流式细胞术分析CD14和MHC-II表达。结果表明,多糖单独刺激时EHPStp-1在31.25μg/m L时的细胞增殖率最高,为23.17%;其次为EHPStc,在31.25μg/m L时的细胞增殖率为16.42%;协同LPS刺激巨噬细胞时,EHPStp-1在31.25μg/m L时的细胞增殖率最高,为20.29%;其次为EHPS60c,在31.25μg/m L时的细胞增殖率为17.41%。在31.25～1.953μg/m L时,EHPStc和EHPStp-1促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用最强,且在31.25～15.625μg/m L时,EHPStc促进噬细胞吞噬作用显着强于EHPStp-1。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2分别在31.25～1.953μg/m L和31.25～3.907μg/m L时,对小鼠腹腔巨噬细胞NO和iNOS分泌功能显着强于其余多糖组。EHPStp-1、EHPStp-2和EHPStc均能显着促进细胞因子的分泌。在31.25～7.813μg/m L时,EHPStp-1组对CD14和MHC-II的表达显着高于EHPStp-2组和BL组。说明,地锦多糖能够有效促进小鼠腹腔巨噬细胞功能,其中EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2免疫增强活性最强。试验Ⅴ地锦多糖对小鼠巨噬细胞的抗氧化作用取安全浓度范围内5个浓度的EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2,加入到培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,培养48 h后,ELSIA法测定EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2对小鼠巨噬细胞的SOD、GSH-PX、MDA及MPO含量。结果表明,EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2均可显着提高小鼠SOD酶、GSH-PX酶活性,其中EHPStp-1组地锦多糖SOD酶、GSH-PX酶活力显着高于其他多糖组。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2在7.813～31.25μg/m L均能显着降低MDA含量,减少体内脂质过氧化程度。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2作用小鼠巨噬细胞后MPO酶活力均有显着降低。其中31.25μg/m L组MPO酶活力显着低于其他多糖组。说明,EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2具有显着的抗氧化作用,以减轻动物机体自由基损伤,保护动物机体,增强免疫功能。试验Ⅵ地锦多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用建立环磷酰胺（CTX）小鼠免疫抑制模型,测定EHPStc和EHPStp-1对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。小鼠随机分为5组（n=10）。分别为正常对照组（NC）、模型对照组（MC）、EHPStc组、EHPStp-1组、阳性对照组（PC组）。NC组小鼠,每天灌胃给予生理盐水,2个多糖组小鼠每天灌胃150 mg/kg EHPStc和EHPStp-1,PC组小鼠给予左旋咪唑（100 mg/kg）。实验持续24 d。第15、16、17 d腹腔注射100 mg Cy/kg bw,对小鼠进行免疫抑制造模。NC组和MC组灌胃0.1 m L/10g生理盐水。结果显示,EHPStc和EHPStp-1在大多时间点能促进T淋巴细胞增殖、促进淋巴细胞进入S期和G2/M期,提高CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的百分率,提高血清中免疫球蛋白和细胞因子水平,提高小鼠免疫器官指数及脾脏抗氧化指标。说明,EHPStc和EHPStp-1能够有效提高免疫抑制小鼠细胞免疫、体液免疫能力。综合评价EHPStp-1免疫增强活性最强。本研究首先通过对地锦多糖提取脱色纯化后,获得总多糖和各分级多糖,利用小鼠外周血淋巴细胞、巨噬细胞和免疫抑制小鼠检测了多糖的淋巴细胞免疫活性、巨噬细胞功能和抗氧化能力及其对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,发现地锦多糖具有显着的免疫增强作用。本研究为地锦草等中药多糖在防治动物疾病中的推广应用提供了理论依据。
徐华益[2]（2020）在《白首乌发酵乳的制备及其抗氧化功效特性的研究》文中进行了进一步梳理本文主要探究了将白首乌添加到发酵乳制品,研制出既具有白首乌功能特性又具备发酵乳风味的白首乌发酵乳。为了使白首乌发酵乳尽可能的发挥白首乌的功能特性同时保证发酵乳的品质,本研究通过比较不同商业发酵剂对白首乌发酵乳的影响来选择合适的发酵剂,并对白首乌添加量、商业发酵剂的接种量、蔗糖的添加量以及发酵温度进行了条件优化,来开发白首乌发酵乳,并探究了白首乌发酵乳的挥发性风味物质、贮藏特性以及部分活性功能成分的含量,主要研究结果如下:1.发酵剂对白首乌发酵乳品质的影响使用4种商业发酵剂Y170E、Y180B、Y438B和Y450A分别制备白首乌发酵乳,研究不同发酵剂对白首乌发酵乳酸度,酸度增长率、粘度、持水率、感官及总抗氧化能力的影响。结果表明,Y180B的产酸能力最强,制备的白首乌发酵乳酸度为94.41°T,而Y170E、Y438B和Y450A的产酸能力均无显着性差异（P>0.05）,四种发酵剂制备的白首乌发酵乳均酸度适中。Y180B和Y450A制备的白首乌发酵乳后酸化较弱,冷藏3天后的酸度增加率仅为4.23%和5.48%。Y450A的产粘性最好,其制备的白首乌发酵乳粘度最高为2780.34 mPa.s,持水率为81.75%。Y438B和Y450A制备的白首乌发酵乳风味质地较优,其感官评分分别为89分和87分。Y450A制备的白首乌发酵乳的总抗氧化能力最强,为0.1247 mM。综合选择Y450A作为制备白首乌发酵乳的发酵剂。2.白首乌发酵乳制备条件优化通过单因素试验探究白首乌的添加量、发酵剂的接种量、蔗糖的添加量和发酵温度对白首乌发酵乳的影响,进而利用正交试验确定白首乌发酵乳制备的最优条件。结果表明,最佳的制备条件为:复原乳中添加2.0%白首乌和5.0%蔗糖,以Y450A为发酵剂按15.0 U/吨接种,40.0℃发酵5 h,此条件下制备的白首乌发酵乳,总抗氧化能力为0.1292 mM,且酸甜适中,口感良好。3.白首乌发酵乳挥发性风味物质分析对白首乌发酵乳的挥发性风味物质进行了测定,筛查出相对含量大于0.1%的挥发性风味物质。结果表明,白首乌发酵乳中共检出48种挥发性风味物质,相对含量为78.31%,主要包括醇类、酮类、酸类、酯类和醛类共5大类物质。其中醇类物质的相对含量最高,为42.63%。此外,发酵乳制品重要的特征风味物质2,3-丁二酮的相对含量在白首乌发酵乳中达到了 7.72%。各种挥发性风味物质的协同作用使得白首乌发酵乳具有良好的感官品质。4.白首乌发酵乳功能活性成分分析对白首乌发酵乳中二苯乙烯苷、黄酮、多酚和多糖的浓度进行测定。结果表明,白首乌发酵乳中含有二苯乙烯苷、黄酮、多酚和多糖等活性功能物质,分别为3.9739 mg/L、0.0174 mg/mL、0.0677 mg/mL 和 1 1.3484 mg/mL,乳酸菌发酵有利于白首乌自身活性物质的释放。5.白首乌发酵乳贮藏特性利用最优条件制备白首乌发酵乳,探究白首乌发酵乳在贮藏过程中活菌数、酸度、粘度、感官品质和总抗氧化能力的变化。结果表明,4℃贮藏15天后,白首乌发酵乳的仍能保持较高的活菌数,其产品的酸度和粘度也仍维持在较好的水平。但受到白首乌的影响,白首乌发酵乳的感官品质和总抗氧化能力在贮藏15天后的变化较大,产生了不愉悦的体验和功能特性的弱化,贮藏9天时仍保持较好的感官和总抗氧化能力。综合其发酵贮藏特性确定了白首乌发酵乳的最适货架期为9天。
向家俊[3]（2019）在《隔山消发酵液免疫调节活性与成分转化研究》文中研究说明隔山消为萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消（Cynanchum auriculatum Royle ex Wight）的块根,主要分布于贵州、四川、云南等地。具有补肝肾、强筋骨、益精血、乌须发、健脾消食,解毒疗疮等功效,现代研究表明其具有清除自由基、提高特异和非特异性免疫等生物活性,其免疫活性成分主要为C21甾体皂苷和糖类,且短糖链（1-2糖基）C21甾体免疫活性高于长糖链的C21甾体苷,高于苷元。发酵是人们认识较早的一类生物化学反应,由于它对食品、药品等进行的修正可满足人类健康或其他方面的要求,在食品、生物、化学领域得到广泛应用。本实验通过探讨隔山消发酵前后免疫活性及其成分变化情况,为隔山消后续开发的提供参考。在优化最佳发酵条件、对比免疫活性、化学成分分离、含量检测系列实验基础上,获得如下结果:1、在发酵菌种适宜发酵环境基础上,以免疫活性成分C21总甾苷含量为指标,通过正交实验对隔山消的发酵条件进行优化,得到发酵最佳条件为温度为35℃、料液比为1:6、用曲量0.5%、时间15 d。2、以隔山消发酵液作为研究对象,市售提高免疫功能的大光荣冬虫夏草口服液为阳性对照,采用环磷酰胺建立免疫低下模型,考察不同浓度下隔山消发酵液及隔山消醇提液小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血细胞能力及免疫器官情况,得出隔山消发酵液其免疫活性优于原药材,且在高剂量时免疫功效优于大光荣冬虫夏草菌丝体口服液。由此得出隔山消在经过发酵操作后,免疫活性增强。3、利用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC及重结晶等操作从隔山消发酵液中分离得到22个化合物,分别鉴定为2,4-二羟基苯乙酮（1）,2,5-二羟基苯乙酮（2）,白首乌二苯酮（3）,告达亭苷元（4）,开德苷元（5）,萝藦苷元（6）,没食子酸（7）,齐墩果酸（8）,去乙酰萝藦苷元（9）,山梨糖醇（10）,亚油酸（11）,β-香树酯醇乙酸酯（12）,β-香树酯醇（13）,告达亭3-O-α-L-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（14）,告达亭3-O-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-夹竹桃吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（15）,开德3-O-β-D-磁麻吡喃糖基-（1→4）-α-L-迪吉吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（16）,20-O-acetyl-12-O-cinnamoyl-3-O-（β-D-cymaropyranosyl）-8,14-dioxo-8,14-secosarcostion（17）,β-谷甾醇（18）,告达亭3-O-α-L-迪吉吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（19）,告达亭3-O-α-L-迪吉吡喃糖基-（1→4）-β-D-夹竹桃吡喃糖基（20）,Saccatol G（21）,开德3-O-α-L-迪吉吡喃糖基-（1→4）-β-D-磁麻吡喃糖苷（22）。其中化合物7,10,11为发酵过程中产生的成分,化合物17为新化合物。4、利用高效液相色谱对所含主要化学成分C21甾苷的含量变化检测,隔山消在经发酵操作后中化合物4含量由1.555 mg·g-1增为2.140 mg·g-1,化合物20含量由0.083mg·g-1增为0.104 mg·g-1;化合物15含量由0.671 mg·g-1降为0.105 mg·g-1、化合物17含量由0.063 mg·g-1降为0.038 mg·g-1、化合物19含量由0.072 mg·g-1降为0.012 mg·g-1。综上,通过对隔山消发酵前后免疫活性及其成分进行分析检测,随着C21甾体皂苷糖基含量减少免疫活性随之增强。
邹锦鹏,冉聪,刘洋,游桂香,侯凯,吴卫[4]（2019）在《白首乌C21甾体苷抗肿瘤研究进展》文中指出白首乌是一种补肾益肝、摄生防老的名贵中药,具有防癌、抗癌的药理作用。C21甾体类化合物被认为是白首乌主要抗癌活性成分之一。对白首乌C21甾体与糖基的主要类型、C21甾体苷抗肿瘤的主要作用机制、对不同肿瘤的作用效果和影响因素、C21甾体苷的毒理学等研究现状进行综述,为白首乌C21甾体苷类抗癌药物的研究提供参考。
白雪[5]（2017）在《常春藤皂甙元抗肝癌作用研究》文中认为肝细胞癌（Hepatocellμlar Carcinoma,HCC）（简称肝癌）的发病率在所有恶性肿瘤中排在第二位,仅次于肺癌,其发病率因地区不同而有所差异,发达国家明显低于发展中国家,亚洲国家的发病率高于美国和西欧国家,在我国其发病率已超过25/10万,其中高发区之肝癌标准化发病率达49.17/10万人口。据统计,我国每年新增近30余万肝癌患者,占全世界每年新增肝癌患者的一半。另外,我国每年死于肝癌的病人约为30万人,患者5年生存率仅为2.7%。肝癌患病一般不易察觉、且发展迅速,患者的生存期短、后期生存质量较差。早期肝癌的治疗以手术治疗为首选并辅以放射疗法和或化学疗法;中晚期肝癌及转移性肝癌以放射疗法和或化学疗法为主,一般不建议手术。近年来,随着中药抗肿瘤研究的兴起,天然植物药在癌症治疗中受到了广泛的关注。在前期研究工作中,笔者曾对八月札水提物的抗肝癌作用进行了初步的研究,发现其能够明显降低H22荷瘤小鼠体内肿瘤的重量,对肝癌细胞的生长和增殖具有显着的抑制作用。同时,八月札水提物还能够显着提高H22荷瘤小鼠的免疫水平,提高机体抗氧化应激、清除自由基和维持内环境活性氧动态平衡的能力。由此推测,八月札水提物可能通过诱导肝癌细胞凋亡和上调机体免疫水平而发挥抗肿瘤作用。本研究将八月札的主效成份常春藤皂甙元（Hederagenin,HD）作为研究对象,并通过H22荷瘤小鼠体内试验和Hep G2细胞体外培养试验,应用MTT、RT-PCR、免疫荧光、Western Blot、AO/EB凋亡染色、Hoechst33342凋亡染色、酶联免疫吸附试验、NK细胞活性检测以及流式细胞术等方法,试图探讨HD抗肝癌作用及在肿瘤细胞调控、诱导细胞凋亡和免疫调节等方面的作用及相关机制,并获得如下结果。1.在HD对H22荷瘤小鼠抗肝癌作用的研究中,首先建立H22荷瘤小鼠模型,随机分为5组,每组12只,即对照组、环磷酰胺（CTX）阳性对照组、HD低剂量组（100mg/Kg）、HD中剂量组（200 mg/Kg）和HD高剂量组（400 mg/Kg）。经不同剂量的HD连续干预H22荷瘤小鼠14 d后,可观察到H22荷瘤鼠肿瘤组织的生长和增殖受到明显的抑制,小鼠的生存状态和生命体征与对照组比较得到明显的改善。HD各试验组（100mg/Kg、200 mg/Kg和400 mg/Kg）均能显着地抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长（P<0.01）,肿瘤抑制率分别为29.67%、42.75%和40.26%。通过HE染色观察H22荷瘤小鼠肝脏和肾脏的组织结构,以及对肝和肾功能相关指标的检测,发现HD对小鼠无明显的毒副作用。通过免疫荧光法检测各试验组H22荷瘤小鼠肿瘤组织中突变型P53、P21和Bcl-2蛋白的表达情况,研究结果显示,对照组小鼠的肿瘤组织中突变型P53和Bcl-2蛋白呈高表达,而P21蛋白则相反呈现低表达。经HD和CTX处理后的小鼠肿瘤组织中突变型P53和Bcl-2蛋白的表达显着降低（P<0.01）,而P21蛋白的表达则显着升高（P<0.01）。以上结果揭示HD可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。2.在HD诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡作用研究中,应用免疫荧光、RT-PCR和Western blot等技术,对肿瘤组织中Bcl-2、Bax、Fas、Fasl、Caspase-3和Caspase-8基因在转录和翻译水平的表达进行了研究。与对照组比较,HD各试验组H22荷瘤小鼠肿瘤组织细胞中Bcl-2在转录和翻译水平的表达均显着降低（P<0.01）,而Bax、Fas、Fas L、Caspase-3、Caspase-8在转录和翻译水平的表达均显着升高（P<0.01）。以上结果揭示HD可能通过激活细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径诱导肿瘤细胞凋亡,从而发挥其抗肿瘤作用。3.在HD对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响研究中,通过分析HD治疗前后小鼠免疫器官组织结构和功能的变化,发现HD各试验组均可以明显的改善H22荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数（P<0.05）,初步判定HD能够促进H22荷瘤小鼠胸腺和脾脏两大免疫器官的修复。同时,HD能够显着提高H22荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力（P<0.01）,显着提高小鼠免疫器官中的NK细胞的杀伤能力（P<0.05）;HD能够显着增加CD4+T淋巴细胞的数量,提升CD4+/CD8+的比值（P<0.05）,表明HD能通过调节T淋巴细胞亚群的数目和比例进而改善细胞免疫应答。另外,HD还能够调节H22荷瘤小鼠外周血中IL-2和TNF-α的表达水平,尤其HD 200 mg/Kg和400 mg/Kg组作用显着（P<0.05）。以上结果揭示HD可能通过修复免疫器官、调控细胞免疫应答和改善细胞因子水平而发挥抗肿瘤作用。4.在HD体外抑制Hep G2细胞作用的研究中,经不同浓度的HD（浓度为0、30、60、90、120和180μg/m L）干预Hep G2细胞24 h和48 h后,HD对Hep G2细胞增殖的抑制作用不断增强,并呈剂量时间依赖关系。HD各试验组对Hep G2细胞的生长和增殖均表现出显着的抑制作用,差异具有统计学意义（P<0.01）;24 h的抑制率分别为5.26%、8.73%、11.00%、16.44%和27.72%;48 h的抑制率分别为1.80%、11.01%、19.38%、27.76%和42.01%。经HE染色和激光共聚焦检测,HD干预48 h后,Hep G2细胞呈煎蛋样改变,出现膜小泡和凋亡小体,核染色质分布不均匀,并且核膜破损,呈典型的细胞凋亡形态学改变。另外,通过Annexin V–FITC双染观察,经HD处理48 h后,Hep G2细胞出现明显的细胞凋亡现象,进一步证明了HD能够诱导Hep G2细胞发生凋亡。当浓度为120和180μg/m L时,HD诱导Hep G2细胞的发生凋亡的百分比分别为12.10%和17.90%,显着高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。以上结果揭示HD可能是通过诱导Hep G2细胞凋亡而发挥其抗肝癌作用。5.在HD体外诱导Hep G2细胞凋亡机制的研究中,应用免疫荧光和Western blot技术,对Hep G2细胞中突变型P53、Bcl-2、Bax、Fas、Fasl、Caspase-3和Caspase-8的表达变化情况进行研究。与对照组比较,经HD处理的Hep G2细胞中突变型P53和Bcl-2蛋白的表达水平明显降低（P<0.01）,而Bax、Fas、Fasl、Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达显着升高（P<0.01）,进一步表明HD诱导Hep G2凋亡作用可能与其激活细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径密切相关。本研究通过动物模型体内试验和细胞培养体外试验两个途径,探讨了HD对H22荷瘤小鼠和Hep G2细胞的抗肿瘤作用及相关机制,通过药理学、病理学、生物化学和分子生物学等相关技术和方法,对与肿瘤发生和发展密切相关的细胞因子、m RNA、蛋白和细胞凋亡（细胞凋亡相关调控通路）等指标进行了系统的检测和分析,证实HD在体内和体外均具有明显的抑制肿瘤细胞生长和增殖的作用,这可能与HD能够激活细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径密切相关,通过本研究可以为临床使用HD协助治疗肝癌提供理论和试验依据。
方希修,王冬梅,周雪松,王风平,成明超,顾海华[6]（2016）在《滨海白首乌(耳叶牛皮消)药理活性研究进展》文中指出滨海白首乌（耳叶牛皮消）是一种传统中药材,为萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消的块根。耳叶牛皮消具有抗肿瘤、调节免疫、抗氧化、抗衰老、调血脂、促进毛发生长、保护脏器等多种药理活性。本文分析了耳叶牛皮消药理活性,提出了今后耳叶牛皮消研究与开发利用方向。
方希修,毕可波,方圆,齐富刚,周雪松,王风平[7]（2016）在《滨海白首乌活性成分及其免疫活性研究进展》文中研究说明滨海白首乌是一种传统中药材,为萝雐科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消的块根,具有对癌细胞的直接杀伤作用、调节免疫、诱导肿瘤细胞凋亡等多种免疫活性。分析了其活性成分及其免疫活性,提出了其研究与开发利用方向。
李艳,黎开燕[8]（2015）在《隔山消的药理作用研究进展》文中认为隔山消来源于萝藦科植物耳叶牛皮消（Cynanchum auriculatum Royle ex Wight）,是广泛分布于四川、湖北、江苏、江西等地的常用草药,又名隔山撬（《分类草药性》）、隔山锹（《天宝本草》）、飞来鹤（《植物名实图考》）。性味甘苦、平、无毒（《贵阳民间药草》）,具有养阴补虚、健脾消食之功效,民间多用于治疗痢疾（《江西草药》）、食积饱胀(《常用民间草药手
彭蕴茹,丁永芳,李友宾,段金廒[9]（2013）在《白首乌研究现状》文中进行了进一步梳理白首乌是传统补益类中药,有补肝肾、强筋骨、益精血、乌须发及延年益寿之功效。近年来,白首乌的抗肿瘤活性日益引起学者的关注,C21甾类成分被认为是其主要活性成分。现就白首乌近年来的研究进展进行综述,为今后合理开发利用其药用资源提供依据。
赵鑫[10]（2011）在《白首乌C21甾总苷的化学降解及降解产物抗肿瘤活性研究》文中认为本学位论文得到江苏省自然科学基金《白首乌C21甾总苷的化学降解及降解产物抗肿瘤活性研究》（BK2009457）的资助。白首乌为祖国传统中药之一,主要来自萝藦科鹅绒藤属植物耳叶牛皮消（Cynanchum auriculatum）、隔山牛皮消（C. wifordii）和戟叶牛皮消（C. bungei）的块根。白首乌历史上多用作补益性中药,被历代医家视为养生防老的珍品,有养血益肝、固肾益精、强筋健骨、乌黑须发及延年益寿等功效。现代药理研究表明,白首乌具有抑制肿瘤、清除自由基、提高特异和非特异性免疫、抗衰老、保护肝脏等活性。前期的研究表明,白首乌抗肿瘤活性成分主要是其所含的C21甾苷类。且白首乌C21甾苷类成分的抗肿瘤活性与其糖链结构有关,即短糖链（1-2个糖基）的C21甾体苷抑瘤率高于长糖链的C21甾体苷,高于苷元。基于此,对白首乌中的C21甾总苷进行不同方式的化学降解,研究不同降解条件下白首乌C21甾总苷降解产物的抗肿瘤活性,以期从降解产物中寻找和发现活性更强或含量更高的抗癌成分。一、白首乌C21甾总苷的化学降解1.利用强酸（HCl）水溶液对白首乌C21甾体皂苷进行降解。HPLC法分析降解产物,以苷元和含1-2糖残基的次生苷的含量为指标,即选择开德苷元-3-O-β-D-洋地黄毒糖苷、告达庭、开德苷元-3-O-α-L-迪吉糖-（1→4）-β-D-磁麻糖苷和告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷为四个指标性成分,采用全概率公式评分法结合正交试验设计优化白首乌C21甾总苷的盐酸解降条件,确定白首乌C21甾总苷盐酸水解最佳条件为：0.5%盐酸溶液,100℃回流6 h。2.利用弱酸（HAc）水溶液对白首乌C21甾体皂苷进行降解。HPLC法分析降解产物,以苷元和含1-2糖残基的次生苷的含量为指标,即选择开德苷元-3-O-β-D-洋地黄毒糖苷、告达庭、开德苷元-3-O-α-L-迪吉糖-（1→4）-β-D-磁麻糖苷和告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷为四个指标性成分,采用全概率公式评分法结合正交试验设计优化白首乌C21甾总苷的醋酸解降条件,确定白首乌C21甾总苷醋酸水解最佳条件为：5.0%醋酸溶液,100℃回流6 h。二、白首乌C21甾总苷降解产物抑制肿瘤活性及急性毒性研究1.将优化降解条件下产生的白首乌C21甾总苷盐酸降解产物、醋酸降解产物以及白首乌C21甾总苷,采用腹腔注射给药方式对接种H22肝癌和Lewis肺癌细胞的皮下移植性肿瘤模型小鼠的抑瘤率进行研究。结果发现,白首乌C21甾总苷醋酸降解产物的抑瘤率要高于盐酸降解产物的抑瘤率,两者的抑瘤效果均高于白首乌C21甾总苷的抑瘤效果。证明对白首乌C21甾总苷降解后的产物可以提高抑制肿瘤活性。2.白首乌C21甾总苷及其醋酸降解产物进行急性毒性实验发现,白首乌C21甾总苷和其醋酸降解产物的LD50值分别是721.2675和984.0087 mg/kg。结果表明,醋酸水解降低了白首乌C21甾总苷的毒性。三、白首乌C21甾总苷醋酸降解产物的分离、结构鉴定利用硅胶、Sephadex LH-20和ODS柱层析以及重结晶等分离纯化手段,对抑瘤作用最强的降解产物——白首乌C21甾总苷醋酸降解产物进行系统分离,分离得到12个化合物。并通过理化性质、光谱（UV、IR）和波谱方法（1H-NMR、13C-NMR）进行鉴定。它们分别为：告达庭苷元-3-O-α-L-迪吉糖-（1→4）-β-D-磁麻糖苷（Caudatin-3-O-α-Z-digin-（1→4）-β-Z）-cymaropyrannoside, B-l),开德苷元（Kidjolanin,B-2）,开德苷元-3-O-α-L-迪吉糖-（1→4）-β-D-磁麻糖苷（Kidjoranin 3-O-a-L-digin-（l→4）-β-D-cymaropyrannoside, B-3）,告达庭-3-O-β-D-磁麻糖苷（Caudatin-3-O-β-D-cym, B-4）,告达庭-3-O-α-L-迪吉糖-（1→4）-β-D-夹竹桃糖苷（Caudatin-3-O-α-L-diginopyranosyl-（l→4）-β-D-oleandropyranoside, B-5）,隔山消苷C3N（Caudatin-3-0-β-D-cymaropyranosyl-（1→4）-a-L-diginopyranosyl-（l→4）-β-D-cymaropyranoside,B-6）,开德苷元-3-O-β-D-磁麻糖-（1→4）-α-L-迪吉糖-（1→4）-β-D-磁麻糖苷（Kidjolanin 3-o-β-D-cymaropyranosyl-（1→4）-α-L-diginopyranosyl-（1→4）-β-D）-cymaropyranoside,B-7),告达庭（Caudatin, B-8）,开德苷元-3-O-β-D-毛地黄毒糖苷（Kidjoranin-3-O-β-D-digitox, B-9）,蒲公英醇乙酸酯（Traxasterol acetate, B-10）,β-胡萝卜苷（Daucosterol,B-11）,β-谷甾醇（β-Sitosterol, B-12）。其中有两个化合物B-1和B-9是从水解产物中分离得到的,原植物中不存在。化合物B-1是新化合物。通过上述研究表明,白首乌C21甾总苷通过强酸（HCl）水溶液和弱酸（HAc）水溶液进行化学降解,能明显提高苷元和短糖链（1-2个糖基）的C21甾体苷的含量,增强其对小鼠H22肝癌和小鼠Lewis肺癌等移植瘤的抑制作用,同时降低白首乌总苷的毒性。总之,本文的各项研究结果为白首乌C21甾总苷开发抗肿瘤药物提供可靠的理论依据。
二、白首乌甙体外对小鼠T淋巴细胞功能影响的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、白首乌甙体外对小鼠T淋巴细胞功能影响的研究（论文提纲范文）
（1）地锦多糖的制备及对小鼠免疫增强活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 地锦草的研究进展 |
| 1.1.1 地锦草的化学成分 |
| 1.1.2 地锦草的药理作用 |
| 1.1.3 地锦草的临床应用 |
| 1.2 多糖的研究进展 |
| 1.2.1 多糖的生物活性 |
| 1.2.2 多糖结构的研究 |
| 1.2.3 多糖的提取及分离纯化 |
| 1.2.4 多糖在动物生产中的应用 |
| 1.3 本研究的目的意义 |
| 第二章 地锦多糖的提取与脱色纯化 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 药材 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 地锦样品的前处理 |
| 2.2.2 地锦多糖的提取 |
| 2.2.3 地锦多糖的含量测定 |
| 2.2.4 地锦多糖中蛋白含量测定 |
| 2.2.5 地锦多糖双氧水脱色的最佳条件的优化 |
| 2.2.6 地锦多糖的纯化 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 地锦多糖的提取结果 |
| 2.3.2 地锦多糖的纯化结果 |
| 2.3.3 地锦多糖双氧水脱色的单因素试验结果 |
| 2.3.4 地锦多糖双氧水脱色的正交试验结果 |
| 2.3.5 地锦多糖双氧水脱色的验证试验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 地锦多糖的提取方法 |
| 2.4.2 多糖的含量测定方法 |
| 2.4.3 地锦多糖的双氧水脱色 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 地锦多糖的结构鉴定 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 地锦多糖 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 地锦多糖的紫外光谱分析 |
| 3.2.2 地锦多糖的红外光谱分析 |
| 3.2.3 地锦多糖的单糖组成分析 |
| 3.2.4 地锦多糖的分子量检测 |
| 3.2.5 地锦多糖的糖醛酸含量测定 |
| 3.2.6 地锦多糖的刚果红试验 |
| 3.2.7 地锦多糖的核磁共振波谱测定 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 地锦多糖的紫外光谱分析结果 |
| 3.3.2 地锦多糖的红外光谱分析结果 |
| 3.3.3 地锦多糖的单糖组成结果 |
| 3.3.4 地锦多糖的分子量结果 |
| 3.3.5 地锦多糖的糖醛酸含量结果 |
| 3.3.6 地锦多糖的刚果红试验结果 |
| 3.3.7 地锦多糖的核磁试验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 多糖的光谱分析 |
| 3.4.2 多糖的分子量及及糖醛酸分析 |
| 3.4.3 多糖的核磁分析 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞免疫活性的影响 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 地锦多糖 |
| 4.1.2 试验动物 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.1.4 主要仪器 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 小鼠外周血淋巴细胞的分离和培养 |
| 4.2.2 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞最大安全浓度的测定 |
| 4.2.3 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞增殖的影响 |
| 4.2.4 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞周期的影响 |
| 4.2.5 地锦多糖对小鼠外周血CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚群的影响 |
| 4.2.6 地锦多糖对小鼠淋巴细胞免疫球蛋白IgA、IgG的影响 |
| 4.2.7 地锦多糖对小鼠淋巴细胞细胞因子分泌的影响 |
| 4.2.8 数据分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞最大安全浓度的测定 |
| 4.3.2 地锦多糖单独刺激时各组淋巴细胞增殖的结果 |
| 4.3.3 地锦多糖协同PHA刺激时淋巴细胞增殖的结果 |
| 4.3.4 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞周期的影响结果 |
| 4.3.5 地锦多糖对CD4~+、CD8~+T 淋巴细胞亚群的影响结果 |
| 4.3.6 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞免疫球蛋白IgA、IgG的影响结果 |
| 4.3.7 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞细胞因子分泌的影响结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 地锦多糖对细胞生长的影响 |
| 4.4.2 地锦多糖对淋巴细胞增殖的影响 |
| 4.4.3 地锦多糖对淋巴细胞周期的影响 |
| 4.4.4 地锦多糖对CD4~+、CD8~+T 淋巴细胞亚群的影响 |
| 4.4.5 地锦多糖对淋巴细胞细胞因子分泌的影响 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 地锦多糖 |
| 5.1.2 试验动物 |
| 5.1.3 主要试剂 |
| 5.1.4 主要仪器 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离和培养 |
| 5.2.2 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞最大安全浓度的测定 |
| 5.2.3 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响 |
| 5.2.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 |
| 5.2.5 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和iNOS生成的影响 |
| 5.2.6 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子的影响 |
| 5.2.7 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞CD14和MHC-II表达 |
| 5.2.8 数据分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞最大安全浓度的测定 |
| 5.3.2 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响结果 |
| 5.3.3 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响结果 |
| 5.3.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和iNOS生成的影响结果 |
| 5.3.5 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子的影响结果 |
| 5.3.6 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞CD14和MHC-II表达的影响结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 地锦多糖对巨噬细胞增殖的影响 |
| 5.4.2 地锦多糖对巨噬细胞吞噬能力的影响 |
| 5.4.3 地锦多糖对巨噬细胞分泌NO和iNOS生成的影响 |
| 5.4.4 地锦多糖对巨噬细胞细胞因子的影响 |
| 5.4.5 地锦多糖对巨噬细胞CD14和MHC-II表达的影响 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的抗氧化作用研究 |
| 6.1 材料 |
| 6.1.1 地锦多糖 |
| 6.1.2 试验动物 |
| 6.1.3 主要仪器 |
| 6.1.4 主要试剂 |
| 6.2 方法 |
| 6.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离和培养 |
| 6.2.2 小鼠腹腔巨噬细胞形态学观察 |
| 6.2.3 地锦多糖对H_2O_2诱导的巨噬细胞氧化损伤细胞存活率影响 |
| 6.2.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞抗氧化作用的测定 |
| 6.2.5 数据分析 |
| 6.3 结果 |
| 6.3.1 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞形态的影响 |
| 6.3.2 地锦多糖对H_2O_2诱导的小鼠腹腔巨噬细胞氧化损伤细胞存活率影响 |
| 6.3.3 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞SOD酶活力的影响 |
| 6.3.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞GSH-PX酶活力的影响 |
| 6.3.5 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞MDA含量的影响 |
| 6.3.6 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞MPO酶活力的影响 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 地锦多糖对巨噬细胞SOD酶活力的影响 |
| 6.4.2 地锦多糖对巨噬细胞GSH-PX酶活力的影响 |
| 6.4.3 地锦多糖对巨噬细胞MDA含量的影响 |
| 6.4.4 地锦多糖对巨噬细胞MPO酶活力的影响 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 地锦多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究 |
| 7.1 材料 |
| 7.1.1 地锦多糖 |
| 7.1.2 试验动物 |
| 7.1.3 主要仪器 |
| 7.1.4 主要试剂 |
| 7.2 方法 |
| 7.2.1 动物分组及处理 |
| 7.2.2 地锦多糖对免疫抑制小鼠免疫器官指数分析 |
| 7.2.3 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾细胞增殖和腹腔巨噬细胞增殖的影响 |
| 7.2.4 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞周期的影响 |
| 7.2.5 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞CD4~+、CD8~+T亚群的影响 |
| 7.2.6 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞免疫球蛋白的影响 |
| 7.2.7 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞细胞因子分泌的影响 |
| 7.2.8 地锦多糖对免疫抑制小鼠抗氧化作用指标的测定 |
| 7.2.9 数据分析 |
| 7.3 结果 |
| 7.3.1 地锦多糖对免疫抑制小鼠免疫器官指数分析 |
| 7.3.2 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾细胞增殖和腹腔巨噬细胞增殖的结果 |
| 7.3.3 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞周期的影响结果 |
| 7.3.4 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞CD4~+、CD8~+T亚群的影响结果 |
| 7.3.5 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞免疫球蛋白IgA、IgG的影响结果 |
| 7.3.6 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞细胞因子分泌的影响结果 |
| 7.3.7 地锦多糖对免疫抑制小鼠抗氧化活性的影响结果 |
| 7.4 讨论 |
| 7.4.1 多糖对免疫抑制小鼠周期和CD4+、CD8+的影响 |
| 7.4.2 多糖对免疫抑制小鼠细胞因子和免疫球蛋白的影响 |
| 7.5 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）白首乌发酵乳的制备及其抗氧化功效特性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 白首乌 |
| 1.1.1 白首乌简介 |
| 1.1.2 白首乌化学成分 |
| 1.1.3 白首乌研究进展 |
| 1.1.4 白首乌的加工利用 |
| 1.2 发酵乳 |
| 1.2.1 发酵乳定义及其功能 |
| 1.2.2 发酵乳常用发酵菌种 |
| 1.2.3 发酵乳研究现状及市场分析 |
| 1.3 研究目的与意义 |
| 1.4 主要研究内容 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 主要原料 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 自首乌发酵乳制备 |
| 2.2.2 酸度的测定 |
| 2.2.3 粘度的测定 |
| 2.2.4 持水率的测定 |
| 2.2.5 总抗氧化能力测定 |
| 2.2.6 发酵乳感官评价方法 |
| 2.2.7 挥发性风味物质的测定 |
| 2.2.8 乳酸菌活菌数量的测定 |
| 2.2.9 二苯乙烯苷测定 |
| 2.2.10 多糖的测定 |
| 2.2.11 黄酮的测定 |
| 2.2.12 多酚的测定 |
| 2.3 数据分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 发酵剂对白首乌发酵乳品质的影响 |
| 3.1.1 发酵剂对白首乌发酵乳酸度的影响 |
| 3.1.2 发酵剂对白首乌发酵乳后酸化的影响 |
| 3.1.3 发酵剂对白首乌发酵乳粘度及持水率的影响 |
| 3.1.4 发酵剂对白首乌发酵乳感官品质的影响 |
| 3.1.5 发酵剂对白首乌发酵乳总抗氧化能力的影响 |
| 3.2 白首乌发酵乳制备条件优化 |
| 3.2.1 白首乌添加量对白首乌发酵乳品质的影响 |
| 3.2.2 发酵剂接种量对白首乌发酵乳品质的影响 |
| 3.2.3 蔗糖添加量对白首乌发酵乳品质的影响 |
| 3.2.4 发酵温度对白首乌发酵乳品质的影响 |
| 3.2.5 正交试验 |
| 3.3 白首乌发酵乳抗氧化能力及其功能活性成分 |
| 3.4 白首乌发酵乳挥发性风味物质分析 |
| 3.5 白首乌发酵乳贮藏特性 |
| 3.5.1 贮藏时间对白首乌发酵乳活菌数的影响 |
| 3.5.2 贮藏时间对白首乌发酵乳酸度的影响 |
| 3.5.3 贮藏时间对白首乌发酵乳粘度的影响 |
| 3.5.4 贮藏时间对白首乌发酵乳感官品质的影响 |
| 3.5.5 贮藏时间对白首乌发酵乳总抗氧化能力的影响 |
| 3.6 小结 |
| 4 结论 |
| 5 参考文献 |
| 6 致谢 |
（3）隔山消发酵液免疫调节活性与成分转化研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 隔山消研究概况 |
| 1.2 发酵技术研究概况 |
| 1.3 研究目的 |
| 1.4 研究意义 |
| 1.5 研究内容 |
| 第二章 隔山消发酵工艺研究 |
| 2.1 仪器与材料 |
| 2.2 隔山消发酵液发酵工艺路线图 |
| 2.3 空白对照发酵液的制备 |
| 2.4 隔山消发酵液中C_(21)甾苷含量测定 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 隔山消发酵液免疫活性研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验仪器 |
| 3.3 隔山消醇提组溶液的制备 |
| 3.4 隔山消发酵组溶液的制备 |
| 3.5 非特异性免疫功能实验 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 隔山消发酵液主要化学成分的分离与鉴定 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.3 隔山消发酵液主要化学成分的分离 |
| 4.4 结构鉴定 |
| 4.5 隔山消发酵液色谱条件 |
| 4.6 分离单体的指认 |
| 4.7 小结 |
| 第五章 隔山消发酵液中C_(21)甾苷的变化研究 |
| 5.1 混合标准品溶液的制备 |
| 5.2 供试品溶液的制备 |
| 5.3 检测波长的选择 |
| 5.4 色谱条件 |
| 5.5 方法学验证 |
| 5.6 隔山消发酵前后C_(21)甾苷含量变化 |
| 5.7 小结 |
| 第六章 全文总结 |
| 6.1 主要研究成果 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（4）白首乌C21甾体苷抗肿瘤研究进展（论文提纲范文）
| 1 白首乌C21甾体苷的分类 |
| 2 白首乌C21甾体苷的抗肿瘤作用机制 |
| 2.1 促进肿瘤细胞凋亡 |
| 2.1.1 调节相关蛋白的合成 |
| 2.1.2 阻滞细胞周期 |
| 2.2 直接杀伤作用 |
| 2.3 抑制肿瘤细胞增殖与转移 |
| 2.4 增强机体免疫力 |
| 3 白首乌C21甾体苷体内、外抗肿瘤效果 |
| 4 白首乌C21甾体苷抗癌效果的影响因素 |
| 4.1 来源 |
| 4.2 分子构效 |
| 4.3 与其他药物联用 |
| 4.4 体内代谢 |
| 5 白首乌C21甾体苷的毒理学研究 |
| 6 结语与展望 |
（5）常春藤皂甙元抗肝癌作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 课题背景及研究目的和意义 |
| 1.2 肝癌的病因及发病机制 |
| 1.3 肝癌的治疗 |
| 1.4 八月札的药理作用 |
| 1.5 常春藤皂甙元的药理作用及研究进展 |
| 1.6 主要研究内容 |
| 第二章 常春藤皂甙元对H22荷瘤小鼠抗肝癌作用研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 试验材料 |
| 2.2.2 试验方法 |
| 2.2.3 试验数据的统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 H22瘤源鼠的制备 |
| 2.3.2 H22荷瘤小鼠模型的建立 |
| 2.3.3 H22荷瘤小鼠生存状态观察 |
| 2.3.4 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用 |
| 2.3.5 HD对H22荷瘤小鼠肝脏和肾脏的组织结构和功能的影响 |
| 2.3.6 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤组织的病理学影响 |
| 2.3.7 免疫荧光法检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中相关蛋白的表达 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 H22荷瘤小鼠模型的评价 |
| 2.4.2 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用 |
| 2.4.3 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞形态学的影响 |
| 2.4.4 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中相关蛋白表达的影响 |
| 2.4.5 HD对H22荷瘤小鼠的毒副作用 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 常春藤皂甙元诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 试验材料 |
| 3.2.2 试验方法 |
| 3.2.3 试验数据的统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 HD对H22荷瘤小鼠体重和肿瘤生长的影响 |
| 3.3.2 HD诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的形态学变化 |
| 3.3.3 RT-PCR法检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中凋亡相关基因mRNA表达 |
| 3.3.4 免疫荧光法检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中凋亡相关蛋白的表达 |
| 3.3.5 Western blot法检测H22荷瘤小鼠肿瘤组织中凋亡相关蛋白的表达 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 HD诱导H22荷瘤小鼠肿瘤组织细胞发生凋亡的形态学变化 |
| 3.4.2 HD诱导H22荷瘤小鼠肿瘤组织细胞发生凋亡的分子机制 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 常春藤皂甙元对H22荷瘤小鼠免疫功能影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 试验材料 |
| 4.2.2 试验方法 |
| 4.2.3 试验数据的统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 H22荷瘤小鼠模型的建立 |
| 4.3.2 H22荷瘤小鼠生存状态观察 |
| 4.3.3 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用 |
| 4.3.4 HD对H22荷瘤小鼠免疫器官免疫功能的调节作用 |
| 4.3.5 HD对H22荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响 |
| 4.3.6 HD对H22荷瘤小鼠NK细胞活性的影响 |
| 4.3.7 HD对H22荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响 |
| 4.3.8 HD对H22荷瘤小鼠血清中IL-2、TNF-α的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 HD对H22荷瘤小鼠生存状态的影响 |
| 4.4.2 HD对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用 |
| 4.4.3 HD对H22荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的调节作用 |
| 4.4.4 HD对H22荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响 |
| 4.4.5 HD对H22荷瘤小鼠非特异性免疫功能的影响 |
| 4.4.6 HD对H22荷瘤小鼠血清中IL-2、TNF-α的影响 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 常春藤皂甙元对HEPG2细胞抑制作用研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 试验材料 |
| 5.2.2 试验方法 |
| 5.2.3 试验数据的统计分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 HD对HepG2细胞增殖的影响 |
| 5.3.2 HD诱导HepG2细胞凋亡的形态学变化 |
| 5.3.3 免疫荧光检测HD诱导HepG2细胞凋亡 |
| 5.3.4 流式细胞仪检测HD诱导HepG2细胞凋亡 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 HD对HepG2细胞增殖能力的抑制作用 |
| 5.4.2 HD诱导HepG2细胞凋亡形态学变化 |
| 5.4.3 Annexin V-FITC凋亡检测结果评价 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 常春藤皂甙元诱导HEPG2细胞凋亡机制研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料和方法 |
| 6.2.1 试验材料 |
| 6.2.2 试验方法 |
| 6.2.3 试验数据的统计分析 |
| 6.3 结果 |
| 6.3.1 HD对HepG2细胞增殖的影响 |
| 6.3.2 HD诱导HepG2细胞凋亡的形态学变化 |
| 6.3.3 免疫荧光法检测HepG2细胞中凋亡相关蛋白的表达 |
| 6.3.4 Western blot法检测HepG2细胞中凋亡相关蛋白的表达 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 HD对HepG2细胞增殖能力的影响 |
| 6.4.2 HD诱导HepG2细胞凋亡的形态学变化 |
| 6.4.3 HD诱导HepG2细胞凋亡的分子机制 |
| 6.5 本章小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 进一步研究问题 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 缩略词语表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 攻读博士学位期间承担的科研任务与主要成果 |
（6）滨海白首乌(耳叶牛皮消)药理活性研究进展（论文提纲范文）
| 1 抗肿瘤作用 |
| 1.1 对癌细胞的直接杀伤作用 |
| 1.2 诱导肿瘤细胞凋亡 |
| 2 免疫调节作用 |
| 3 抗氧化、抗衰老作用 |
| 4 调血脂作用 |
| 5 促进毛发生长作用 |
| 6 对脏器的保护作用 |
| 6.1 对心脏功能的保护作用 |
| 6.2 对脑细胞1的保护作用 |
| 6.3 对肝脏的保护作用 |
| 6.4 对胃肠的作用 |
| 7 毒理学研究 |
| 8 展望 |
（7）滨海白首乌活性成分及其免疫活性研究进展（论文提纲范文）
| 1 滨海白首乌的活性成分 |
| 1.1 多糖类 |
| 1.2 苯酮类 |
| 1.3 C21甾体酯苷化合物 |
| 1.4 磷脂类 |
| 2 滨海白首乌药理活性 |
| 2.1 抗肿瘤 |
| 2.1.1 直接杀伤癌细胞。 |
| 2.1.2 诱导肿瘤细胞凋亡。 |
| 2.2 免疫调节 |
| 3 结语 |
（8）隔山消的药理作用研究进展（论文提纲范文）
| 1 对胃肠道的作用 |
| 2 免疫调节作用 |
| 3 抗肿瘤作用 |
| 4 抗衰老作用 |
| 5 保肝作用 |
| 6 其他作用 |
（9）白首乌研究现状（论文提纲范文）
| 1 抗肿瘤作用 |
| 1.1 不同药材来源 |
| 1.1.1 泰山白首乌 |
| 1.1.2 耳叶牛皮消 |
| 1.2 抗肿瘤活性成分 |
| 1.3 抗肿瘤作用机制研究 |
| 1.3.1 对癌细胞的直接杀伤作用 |
| 1.3.2 诱导肿瘤细胞调亡 |
| 1.3.3 增强免疫功能 |
| 1.4 抗肿瘤作用研究存在的问题与不足 |
| 1.4.1 活性跟踪的化学成分研究不足 |
| 1.4.2 作用机制研究不够深入 |
| 1.4.3 体内过程研究较少 |
| 2 免疫调节作用 |
| 3 抗衰老和抗氧化作用 |
| 4 保肝作用 |
| 5 对心脏功能的影响 |
| 6 对神经细胞的影响 |
| 7 促进毛发生长作用 |
| 8 调血脂作用 |
| 9 对胃损伤的保护作用 |
| 10 其他作用 |
| 11 体内代谢 |
| 12 毒理学研究 |
| 13 展望 |
（10）白首乌C21甾总苷的化学降解及降解产物抗肿瘤活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 第一章 白首乌的化学成分与药理作用研究进展 |
| 1 化学成分 |
| 2 药理作用 |
| 3 结语 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第二章 HPLC法测定白首乌中4个有效成分的含量 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 白首乌C_(21)甾总苷化学降解工艺的研究 |
| 1 降解产物含量测定方法研究 |
| 2 强酸(HCl)水溶液降解 |
| 3 弱酸(HAc)水溶液降解 |
| 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 白首乌C_(21)甾总苷及其降解产物对小鼠移植瘤的抑瘤作用 |
| 1 白首乌C_(21)甾体部位和降解产物对H_(22)荷瘤小鼠体内抗肿瘤试验 |
| 2 白首乌C_(21)甾体部位和降解产物对Lewis小鼠实体瘤体内抗肿瘤试验 |
| 3 白首乌C_(21)甾体部位和醋酸降解产物的急性毒性研究 |
| 参考文献 |
| 第五章 白首乌C_(21)甾总苷醋酸降解产物化学成分研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 提取与分离 |
| 3 化合物结构鉴定 |
| 参考文献 |
| 第六章 结语 |
| 附图 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
四、白首乌甙体外对小鼠T淋巴细胞功能影响的研究（论文参考文献）
- [1]地锦多糖的制备及对小鼠免疫增强活性研究[D]. 孙文静. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [2]白首乌发酵乳的制备及其抗氧化功效特性的研究[D]. 徐华益. 扬州大学, 2020(05)
- [3]隔山消发酵液免疫调节活性与成分转化研究[D]. 向家俊. 贵州大学, 2019(05)
- [4]白首乌C21甾体苷抗肿瘤研究进展[J]. 邹锦鹏,冉聪,刘洋,游桂香,侯凯,吴卫. 中草药, 2019(03)
- [5]常春藤皂甙元抗肝癌作用研究[D]. 白雪. 西北农林科技大学, 2017(11)
- [6]滨海白首乌(耳叶牛皮消)药理活性研究进展[J]. 方希修,王冬梅,周雪松,王风平,成明超,顾海华. 中国野生植物资源, 2016(04)
- [7]滨海白首乌活性成分及其免疫活性研究进展[J]. 方希修,毕可波,方圆,齐富刚,周雪松,王风平. 现代农业科技, 2016(09)
- [8]隔山消的药理作用研究进展[J]. 李艳,黎开燕. 现代中西医结合杂志, 2015(02)
- [9]白首乌研究现状[J]. 彭蕴茹,丁永芳,李友宾,段金廒. 中草药, 2013(03)
- [10]白首乌C21甾总苷的化学降解及降解产物抗肿瘤活性研究[D]. 赵鑫. 南京中医药大学, 2011(04)