一、硬粒小麦-簇毛麦双二倍体与普通小麦杂种F_1的花粉母细胞减数分裂行为的研究(论文文献综述)
李家创[1](2021)在《5份小麦-华山新麦草衍生后代的分子细胞遗传学鉴定及重要农艺性状评价》文中研究表明华山新麦草(Psathyrostachys huashanica Keng;2n=2x=14,Ns Ns)是来自禾本科(Poaceae)、新麦草属(Psathyrostachys Necski)的一种多年生二倍体异花授粉植物,因其具有早熟、抗多种小麦病害(锈病、白粉、赤霉、全蚀)、耐寒抗旱、耐盐碱、矮秆、分蘖多等优良特性,被认为是普通小麦(Triticum aestivum)改良的宝贵遗传资源。通过远缘杂交技术和染色体工程的方法创制而成的小麦—华山新麦草衍生系则是快速有效利用华山新麦草Ns基因组最重要的中间材料。本研究利用七倍体杂种H8911(2n=49,AABBDDNs)和硬粒小麦(Triticum durum)Trs-372(2n=28,AABB)杂交后产生的子代,经连续自交6-7代后从中筛选出5个衍生后代:DH5、DH88、DH66、TR77、DH109,综合采用细胞学观察、原位杂交技术(GISH和Mc-FISH)、分子标记技术(EST-STS、SSR、SCAR和SNP芯片)等方法,结合田间性状调查,对其进行了详细分析,主要研究结果如下:(1)华山新麦草染色体核型的初步分析:对研究材料的外源亲本—华山新麦草的染色体组进行了初步的核型分析,推测其核型公式为2n=2x=14=12m(4sat)+2sm,Stebbins核型为2A型,平均臂比为1.4,在属内居于较高的水平,但其在植物界进化水平偏低。(2)细胞学观察表明DH5的染色体组型为2n=42+Ti=21Ⅱ+Ti(Ti指小片段染色体);GISH分析显示DH5含有一个小的华山新麦草染色体片段,该片段无法在减数分裂阶段与小麦染色体配对,只能从父本传递给子代,传递率约为1/2;FISH实验表明DH5是一个2A缺体2B四体;分子标记结果表明DH5中附加的外源小片段来自华山新麦草5Ns染色体的短臂;利用标记转化法开发了8对可以用于检测华山新麦草5Ns染色体的SCAR标记。农艺性状调查表明DH5株高较低,对条锈病有较高抗性,外源染色体小片段的有无对农艺性状影响不大。(3)细胞学观察表明DH88的染色体组型为2n=44=22Ⅱ;GISH分析显示其含有一对华山新麦草的染色体片段,这对外源染色体片段可以正常配对并传递给子代。EST-STS分子标记表明DH88所附加的一对染色体片段来自华山新麦草6Ns染色体。DH88对条锈病表现为高抗,可能是由于华山新麦草6Ns染色体的抗病基因进入导致。(4)细胞学观察DH66的染色体组型为2n=42=21Ⅱ;GISH实验显示DH66中有一对小麦染色体被华山新麦草染色体所替代,这对外源染色体可以正常联会配对并传递到子代中;Mc-FISH实验结果表明DH66缺失了其一对5D染色体。分子标记表明DH66获得了华山新麦草5Ns染色体而失去了小麦5D染色体;DH66的小麦15K SNP芯片结果也在5D染色体的位置上出现了和华山新麦草相似度高和小麦亲本7182相似度低的交叉峰,综合分子标记的结果可以得知DH66中一对5D染色体被华山新麦草5Ns染色体所代换。DH66株高较低,在成株期对条锈病表现为高抗,籽粒品质较好,可以作为抗条锈病和优质小麦育种的重要材料。(5)有丝分裂分析表明TR77的染色体组型为2n=42=21Ⅱ,其中有一对染色体超过1/2的部分被外源染色体所替代。减数分裂过程中外源染色体可以正常配对并传递给子代,表明TR77是一个细胞遗传学稳定的小麦—华山新麦草易位系。分子标记和Mc-FISH分析显示在TR77中形成了5DL-3DS·3DL染色体和3DS-Ns L·Ns S染色体,因此TR77是一个包含了双重易位的小麦—华山新麦草衍生材料。对TR77的小麦15K SNP芯片分析推断出易位发生在5D染色体物理位置的202.3Mb和213.1Mb处,靠近着丝粒。TR77具有圆锥状的穗型且无芒,其穗子较长,穗粒数多,株高较高,在全生育期对白粉病表现高抗,可作为研究小麦和其近缘属种间多重易位和抗白粉病育种的优异种质资源。(6)衍生系DH109和衍生系DM131的异同性分析:DH109从小麦—华山新麦草衍生后代中筛选而来,DM131从小麦—滨麦衍生后代中筛选获得。通过分子细胞遗传鉴定确认两个衍生系都为3Ns(3D)二体异代换系材料,但是DH109为小麦—华山新麦草3Ns(3D)二体异代换系,DM131为小麦—滨麦3Ns(3D)二体异代换系。两个材料的细胞学观察和GISH结果较为相似,均是稳定的衍生系材料。但是,两者的STS和SCAR标记共用性不高,外源染色体的FISH核型图完全不同。农艺性状上,两者都轻微感条锈病,苗期都高抗白粉病;对于赤霉病,DH109表现为高抗而DM131表现为高感。形态学特征上,DH109的籽粒较大,而DM131的穗子更长、穗粒数和分蘖数较多;两个材料的籽粒品质特征介于两个小麦亲本之间。综上,华山新麦草3Ns染色体和滨麦3Ns染色体对小麦的性状改变差异明显。这两个衍生系可以用于小麦抗白粉、抗赤霉病育种以及新麦草属和赖草属中Ns染色体的差异化比较。华山新麦草核型图的绘制为进一步了解这一外缘种提供了理论基础;五个衍生后代的鉴定丰富了小麦的遗传种质库,对于抗病、高产和优质小麦育种具有重要的利用价值;不同属Ns染色体在小麦背景中的差异比较对研究小麦近缘属种的亲缘和进化关系提供了依据。
王艳珍[2](2021)在《普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生后代的分子细胞遗传学研究及特异标记开发》文中认为小麦远缘杂交是通过导入外源物质来增加小麦的遗传多样性,从而达到定向遗传改良的目的。本研究对小麦-十倍体长穗偃麦草的部分衍生后代进行了分子细胞遗传学鉴定,筛选出了一系列稳定遗传、综合农艺性状突出的衍生材料,以期为小麦遗传育种工作提供重要中间材料与遗传资源。其次,本研究开发了十倍体长穗偃麦草的特异分子标记,加快对十倍体长穗偃麦草遗传物质的检测,同时为挖掘十倍体长穗偃麦草优异基因奠定了基础。主要研究结果如下:(1)对十倍体长穗偃麦草的染色体核型及与其他种属的亲缘关系做了初步分析。利用传统的细胞学方法,通过计算十倍体长穗偃麦草70条染色体各自的相对长度系数、着丝粒指数、臂比等指标可得出结论,本试验中的十倍体长穗偃麦草共包含35对染色体,其中,亚中间着丝粒染色体7对(7sm),中间着丝粒染色体28对(28m),有6对染色体具随体(6sat)。因此,可推测出本研究中所用的十倍体长穗偃麦草的染色体核型公式为:2n=10x=70=56m(8sat)+14sm(4sat),属于“2B”类型。同时,利用本实验室现有的879对SSR引物和EST引物扩增筛选到了156个十倍体长穗偃麦草基因组特异分子标记,其中包括42个SSR标记,114个EST标记,这些分子标记为十倍体长穗偃麦草衍生后代中外源遗传物质的鉴定提供了理论基础。分子标记结果表明,有249对引物可在十倍体长穗偃麦草、中间偃麦草和拟鹅观草中都扩增出相同大小的条带,有52对引物可在十倍体长穗偃麦草、华山新麦草和滨麦中扩增出相同条带。故推测,本试验中的十倍体长穗偃麦草与拟鹅观草和中间偃麦草的亲缘关系较近,而与华山新麦草和滨麦的亲缘关系较远。(2)采用经典的细胞遗传学方法,从228个衍生后代中筛选鉴定出9个稳定的十倍体长穗偃麦草部分双二倍体,并将其命名为CA51、CA52、CA53、CA61、CA62、CA63、CA64、CB14和CB16。细胞学结果表明,9个部分双二倍体都含有56条染色体且在减数分裂第一次中期形成28个二价体,表明它们在细胞学上具有高度稳定性。基因组原位杂交(GISH)结果表明,CA51、CA52、CA53和CA63中包含40条普通小麦染色体和16条十倍体长穗偃麦草染色体;CA61、CA62、CA64和CB14中含有42条普通小麦的染色体和14条十倍体长穗偃麦草的染色体;而CB16携带了12条十倍体长穗偃麦草染色体。同时,在CA61和CB16中发现了来自十倍体长穗偃麦草的小片段易位染色体。基于荧光原位杂交技术(FISH)构建了9个部分双二倍体的FISH核型,并发现普通小麦1B、4B、6B和5A染色体上有明显的信号变异。分子标记的多态性结果表明,这些部分双二倍体不同于已报道的八倍体小偃麦。抗病性鉴定表明,9个部分双二倍体中有8个在成株期对条锈病、白粉病和赤霉病都有较强的抗性。此外,9个部分双二倍体在籽粒大小、品质等方面均不同于普通小麦亲本,为小麦远缘杂交提供了优质的桥梁材料。(3)本试验鉴定了7个稳定的异代换系,其中包括3个二体异代换系(CH10A5,CH114-B4,CH18122)和4个双重异代换系(CH18035,CH18050,CH18113,CH18130)。7个异代换系的根尖染色体数目均为42条,花粉母细胞构型均为2n=21II,田间表型偏向与普通小麦。其中CH10A5为小麦-十倍体长穗偃麦草1JS(1D)二体异代换系,田间高抗条锈病,中抗白粉病和赤霉病;CH114-B4是小麦-十倍体长穗偃麦草7J(7B)二体异代换系,成株期对条锈病和赤霉病表现为高抗,对白粉病表现为中抗;CH18122是小麦-十倍体长穗偃麦草4JS(4D)二体异代换系,表现为高抗条锈病、白粉病和赤霉病。4个双重异代换系中,CH18035可能的染色体组成为2n=42=38T.a+2T.p(1JS)+2T.p(6JS)(T.a代表普通小麦染色体,T.p代表十倍体长穗偃麦草染色体),成株期高感条锈病和白粉病;CH18050可能的染色体组成为2n=42=38T.a+2T.p(2J)+2T.p(7J),成株期高抗条锈病和白粉病;CH18113可能的染色体组成为2n=42=38T.a+2T.p(1JS)+2T.p(6J),高抗条锈病,高感白粉病;CH18130可能的染色体组成为2n=42=38T.a+2T.p(2J)+2T.p(4JS),对条锈病和白粉病表现为高抗。此外,7个异代换系在籽粒粗蛋白含量、面筋含量及淀粉含量方面均比普通小麦亲本7182有所提高,可用作小麦遗传改良的中间材料。(4)基于简化基因组测序技术(SLAF-seq),从二体异代换系CH10A5、普通小麦7182和十倍体长穗偃麦草中分别获得11,931,086、10,383,011和9,871,061条reads,平均Q30为90.34%,平均GC含量为46.55%,最终得到的SLAF标签数分别为467,788、157,996、500,27。基于有参部分,通过BWA比对,共得到十倍体长穗偃麦草564,364个多态性SNP位点,注释到25903个差异基因,并通过在功能数据库比对,挖掘了十倍体长穗偃麦草响应逆境胁迫和籽粒相关的候选基因。基于无参序列分析,从十倍体长穗偃麦草18,971条unmapped SLAFs中挑选1,096条序列设计引物,经过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,共得到了859个特异标记,其开发效率达到78.38%。为开发部分同源群特异标记,针对1JS染色体上与十倍体长穗偃麦草相似度≥95%的序列设计引物,从957对引物中筛选到507个可作为1JS染色体特异的STS标记。为进一步检测这些标记的多态性和实用性,同时对多个小麦近缘种属了进行了扩增检测。结果表明,这些标记在十倍体长穗偃麦草(49个)、百萨偃麦草(38个)、二倍体长穗偃麦草(45个)、拟鹅观草(89个)、中间偃麦草(57个)均产生多态性;此外,在滨麦、华山新麦草、黑麦、卵穗山羊草、乌拉尔图小麦和粗山羊草中分别筛选出70个、51个、67个、54个、17个和43个特异分子标记。根据小麦及其近缘种特异分子标记的数目,初步推测出麦类物种亲缘关系的远近。本研究也得到了部分基因组特异性标记,其中包括St基因组特异标记21个,E基因组特异标记21个,Ee基因组特异标记15个和Eb基因组特异标记6个,为后续十倍体长穗偃麦草遗传物质的检测及染色体重排奠定理论基础。
祁晓月[3](2021)在《硬粒小麦-中间偃麦草杂种后代的分子细胞遗传学研究》文中认为远缘杂交是小麦种质创新和遗传改良的重要手段。本研究利用5种硬粒小麦同中间偃麦草及其新种质(寒地麦草)杂交,并对杂种F1、F2材料进行环境适应性选育和分子细胞遗传学分析,旨在为丰富黑龙江省小麦种质资源提供材料基础,为寒地冬小麦研究提供科学依据。(1)连续两年的杂交实验结果表明,共配制杂交组合9个,完成杂交穗数41个,杂交小穗数445个,小花数952个,获得杂交种317粒,平均杂交结实率为32.28%。寒地麦草1-1-4、9-1-2和中间偃麦草的花期早于其它寒地麦草,与硬粒小麦同步,且抗寒性好,生长旺盛,益于杂交,可作为重点亲本用于今后的杂交工作。(2)形态学分析结果表明,得到的16份杂种F1中,有2份为小麦类型杂种,其它均为麦草类型杂种。16份杂种F1全部具有再生性,其中6份可自交结实。2020-2021年有16份杂种F1材料越冬返青,具有耐寒性,可以进一步选育鉴定。(3)细胞学鉴定结果表明,F1材料体细胞染色体数为35,F219114-5055-05、F219114-5061、F219114-5061-26,体细胞染色体数为28条。分子标记检测结果表明,杂种后代所携带的中间偃麦草亚基因组遗传成分有所不同。(4)原位杂交结果表明,杂种F1染色体组由35条染色体构成,其中有21条染色体来源于中间偃麦草染色体,14染色体来自于亲本硬粒小麦,F1杂种符合远缘杂交染色体组构成规律,可为下一步选育综合性状好的远缘杂交后代材料提供染色体组的来源证据。
王海燕,龚志云,蒋甲福,周宝良,娄群峰,曹清河,席梦利,陈佩度,顾铭洪,张天真,陈发棣,陈劲枫,李宗芸,王秀娥[4](2021)在《江苏省植物细胞遗传学研究回顾与展望》文中研究指明20世纪初"遗传的染色体学说"的提出和证明标志着细胞遗传学交叉学科建立,伴随相关学科的发展,20世纪60年代末期细胞遗传学又与分子遗传学相结合,建立发展了分子细胞遗传学交叉学科。分子细胞遗传学以DNA分子原位杂交技术为核心,不断拓展应用领域,为生命科学研究提供了直观、高效的技术手段。原位杂交技术与基因组、细胞生物学等技术结合,被广泛应用于人类、动物、植物的起源、进化、驯化等基础研究和远缘杂交、染色体工程等应用研究。通过形象地展示DNA、RNA、蛋白质在细胞中的实际位置,揭示DNA序列之间的实际位置和顺序、亲缘物种间的进化关系和结构重排、基因组拼接序列的质量、转录水平RNA和翻译水平蛋白质的位置和数量变化等。江苏省遗传学会会员单位南京农业大学、扬州大学、南京林业大学、江苏师范大学、徐淮地区农科院等自20世纪中期开展细胞遗传学理论技术研究,伴随学科发展不断创新,建立了较完善的分子细胞遗传技术体系,并成功应用于开展植物系统进化、远缘杂交、染色体工程、基因组学等研究,取得了一批研究成果。本文将主要综述江苏省在该领域取得的重要进展,并展望未来发展方向。
马晓兰[5](2020)在《簇毛麦6V#4S特异标记连锁图谱建立与小麦染色体新易位系创制》文中指出簇毛麦(Dasypyrum villosum(L.)P.Candary,syn.Haynaldia villosa Schur)是小麦的近缘种属,含有多种有益基因。Pm97033是小麦-簇毛麦T6V#4S·6DL臂间易位系,携带簇毛麦抗白粉病基因PmV,广谱高抗小麦白粉病,且其基因序列及其对多数白粉菌株的反应型与位于6V#2S上的抗白粉病基因Pm21有差异,因此,是1个具有潜在应用价值的白粉病优异抗源。然而,T6V#4S·6DL易位染色体在杂种后代中的遗传传递率较低,在育种上尚未广泛利用。为了解析引起T6V#4S·6DL易位染色体遗传不稳定的原因,靶向改造T6V#4S·6DL易位染色体,促进其在育种中的利用,本项目通过:(1)开发PmV和Pm21基因以及6A,6D特异的分子标记以便于分子标记辅助选择;(2)将T6V#4S·6DL和T6V#2S·6AL易位染色体同时导入ph1b突变体的遗传背景中,以诱导外源染色体臂间的基因重组;(3)辐射处理T6V#4S·6DL易位系植株花粉以截短6V#4S的非靶标区域;(4)利用6V#4(6D)和6V#2(6A)2个异代换系杂交及杂种F2分离群体,构建多态性的6VS特异分子标记的遗传连锁图谱,以分析其与小麦,大麦各染色体间同源序列排序保守性的差异。研究取得以下主要进展:1.以中国春第6同源群的缺体四体系、普通小麦宛7107、易位系T6V#2S·6AL(10SR3109)、易位系T6V#4S·6DL(Pm97033)、簇毛麦No.1026(6V#4)和D.v#2(6V#2)为材料,通过在http://plants.ensembl.org/Triticum aestivum/Info/Index和https://www.ncbi.nlm.nih.gov/网站上的搜索获取相关染色体区信息和基因序列,开发PmV特异标记3个、Pm21特异标记5个、6AS标记1个和6DS的特异分子标记2个、6AS和6DS共显性分子标记1个。2.以中国春CSph1b突变体为亲本,将其分别与T6V#2S·6AL和T6V#4S·6DL易位系杂交,F1复合杂交,对后代进行染色体特异的分子标记筛选和基因组原位杂交鉴定,在复交F3群体中获得了不同类型的新易位系:T6V#4S·6AL纯合易位3株、杂合易位1株,6V#2S#4S·6DL重组易位1株。3.采用不同剂量的60Co-γ射线辐射处理易位系T6V#4S·6DL的花粉,利用分子标记的筛选和基因组原位杂交技术的鉴定,同时结合抗白粉病表型的观察,在杂种F2代分别筛选到了含有PmV和不含有基因PmV的6V#4S截断的易位系,其中含有该基因的植株表型为抗白粉病,不含有该基因的植株表型为感白粉病。4.利用2份异代换系6V#2(6A)和6V#4(6D)进行杂交,构建了F1和F2分离群体。对F1代植株的花粉母细胞进行基因组原位杂交鉴定,证明79.76%的PMCs中两个外源染色体6V#2和6V#4彼此可以配对和交换。在F2分离群体中,调查了9个6V短臂特异的分子标记在323个F2群体中的分离与交换情况,并绘制了9个标记的遗传连锁图谱。与基于标记同源序列绘制的小麦和大麦物理图谱对比显示,6V与大麦6H基因组和小麦6B基因组具有较保守的共线性,其次是小麦染色体6A和6D。5.利用特异于6VS,6A和6D的分子标记辅助选择,从2份异代换系6V#2(6A)和6V#4(6D)的杂交F2群体中,筛选获得3种新的染色体代换类型:6V#4(6A),6V#2(6D)和外源染色体重组子的异代换系。
李建波[6](2020)在《小麦-茸毛偃麦草新型渐渗系的分子细胞遗传学解析》文中指出中间偃麦草(Thinopyrum intermedium,2n=6x=42,JJJsJsStSt)属于小麦野生近缘植物,多年生、异花授粉,具有耐盐、耐旱、抗寒等抗逆性以及抗白粉病、条锈病、叶锈病、秆锈病、赤霉病等抗病性,是小麦远缘杂交和染色体工程育种的重要基因资源。茸毛偃麦草(Th.intermedium ssp.trichophorum,2n=6x=42,JJJsJs StSt)是中间偃麦草的一个亚种,与中间偃麦草一样具有抗逆、抗病等优良特性,区别在于其穗部和叶片上覆盖有茸毛,是小麦抗性改良的重要供体之一。TE1508是本实验室选育的小麦-茸毛偃麦草部分双二倍体,成株期免疫或高抗白粉病、条锈病、叶锈病、纹枯病等;小麦-中间偃麦草7J异体代换系源于八倍体小偃麦TAF46与普通小麦Vilmorin27杂交、回交后代,具有抗秆锈病(Ug99)与紫色胚芽鞘等性状。为了将TE1508与TAF46携带的优异农艺性状导入栽培小麦,本文实施了以下研究工作:(1)分别利用六倍体小黑麦和普通小麦与TE1508进行杂交、回交,在后代中选育了一批新型小偃麦衍生系,采用非变性荧光原位杂交(non-denaturing fluorescence in situ hybridization,ND-FISH)、基因组原位杂交(genomic in situ hybridization,GISH)、分子标记、抗性鉴定、田间农艺性状调查等方法,评估了这些材料在小麦遗传多样性改良方面的潜在价值,并初步定位了一些源于偃麦草的优异基因;(2)利用ND-FISH、分子标记等分子细胞遗传学方法,鉴定了多份小麦-中间偃麦草7J染色体易位系,并初步定位了一个苗期胚芽鞘紫色基因。主要研究结果如下:1、利用Oligo-pSc119.2、Oligo-pTa535、Oligo-pSt122、Oligo-(GAA)7、Oligo-(CAA)7、Oligo-3A1、Oligo-5SrDNA、Oligo-6H-2-100、Oligo-pTa71九种寡聚核苷酸探针组成的连续多色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mc-FISH)与拟鹅观草总基因组DNA为探针的GISH,详细鉴定了TE1508(2n=56)的体细胞染色体核型结构,其染色体组为40W+6St+4J+6Js,具体核型为:20对小麦染色体(缺失1对4B染色体)+3对St基因组染色体(1对1St、1对6St与1对7St)+3对Js基因组染色体(1对2Js、1对4Js与1对5Js)+2对J基因组染色体(1对3J与1对4J)。在TE1508与六倍体小黑麦Currency三属杂种自交后代,发现:(1)茸毛偃麦草染色体比黑麦染色体更容易在小麦背景中传递下去;(2)茸毛偃麦草Js基因组染色体比J、St基因组染色体传递率更高。2、利用Oligo-pSc119.2、Oligo-pTa535等探针组成的mc-FISH与中间偃麦草总基因组DNA为探针的GISH,分析了本研究选育的新型小偃麦衍生系体细胞染色体核型,得到以下结果:(1)品系X24C-10是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草4J(4B)代换系;(2)品系X24C-5是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草4Js(4B)代换系;(3)品系X24C-14是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草2Js附加系;(4)品系A1082是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草3J附加系;(5)品系X24C-1-1是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草T4BS·4JL易位系;(6)品系A5-5是一个细胞学稳定的小麦-茸毛偃麦草T4BS·5JsL罗宾逊易位系。3、利用澳大利亚的条锈菌小种(239 E237 A-17+33+与108 E205 A+)、叶锈菌小种(104-1,3,5,7,9,10,12,13+Lr37)、秆锈菌小种(34-1,2,3,4,5,6,7与98-1,2,(3),(5),6)以及我国当下流行的CYR32、CYR33与CYR34(或v26)的混合小种,对本研究选育的小偃麦衍生系进行了抗性评估,得到以下结果:(1)X24C-10(4J/4B代换系)在苗期与成株期均高抗条锈病,苗期高抗秆锈病;(2)X24C-5(4Js/4B代换系)在苗期中抗秆锈病,成株期高抗条锈病;(3)X24C-14(2Js附加系)在苗期与成株期近免疫或高抗条锈病,苗期中抗叶锈病与秆锈病;(4)A1082(3J附加系)在苗期近免疫叶锈病与秆锈病,成株期近免疫条锈病;(5)X24C-1-1(T4BS·4JL易位系)在苗期与成株期均高抗条锈病;(6)A5-5(T4BS·5JsL罗宾逊易位系)在苗期对澳大利亚毒性极强的条锈菌小种239 E237 A-17+33+表现为免疫,而对毒性较低的条锈菌小种108 E205 A+表现为高感,成株期中抗条锈病。4、利用PCR-based landmark unique gene(PLUG)与intron targeting(IT)两种分子标记,对本研究选育的小偃麦衍生系进行分子标记检测,得到以下结果:(1)获得81个4J染色体特异标记,包括38个PLUG标记与43个IT标记;(2)筛选到97个4Js染色体特异标记,包括20个PLUG标记与77个IT标记;(3)筛选到174个2Js染色体特异标记,包括41个PLUG标记与133个IT标记;(4)筛选到71个3J染色体特异标记,包括29个PLUG标记与42个IT标记;(5)筛选到106个5JsL染色体特异标记,包括32个PLUG标记与74个IT标记。5、通过比较X24C-10(4J/4B代换系)与X24C-1-1(T4BS·4JL易位系)在抗性、田间农艺性状、染色体结构等方面的差异,在4JL染色体0.60-1.00区段初步定位了一个蓝粒基因与一个抗条锈病基因,在4JS染色体或4JL染色体0.00-0.60区段初步定位了一个苗期抗秆锈病基因;通过同源基因克隆测序、分析,在4JL染色体0.60-1.00区段克隆到一个R2R3-MYB类型转录因子ThMYB4J,推测与该区段的蓝粒基因有关。6、利用ND-FISH、分子标记分析等方法,明确了7J染色体的核型结构,筛选到88个7J染色体特异标记,详细鉴定出12种小麦-中间偃麦草7J染色体易位系的核型结构,构建了7J染色体的分子标记图谱,初步定位了一个苗期胚芽鞘紫色基因(位于7JS染色体0.35-0.62区段),并开发设计出两个新的7J染色体特异EST-PCR标记。综上所述,本研究选育了一系列携带优异农艺性状的新型小偃麦衍生系,并初步定位了1个抗条锈病基因、1个抗秆锈病基因、1个蓝粒基因、1个苗期胚芽鞘紫色基因,并克隆了1个可能与蓝粒基因有关的R2R3-MYB-like转录因子,在一定程度上弥补了小麦优异基因数目少的问题,为小麦品种改良奠定了良好的基础。
罗贤磊[7](2019)在《长穗偃麦草染色体导入小麦背景的研究》文中提出长穗偃麦草(Thinopyrum elongatum)是小麦重要的野生近缘种,属于小麦三级基因源,具有大穗多花、耐旱、抗寒、耐盐、生长势强等诸多小麦不具备的优良性状,是小麦遗传改良中最有价值的优异外源基因供体之一。通过小麦与长穗偃麦草远缘杂交培育附加系、代换系及易位系是利用长穗偃麦草优良特性的重要途径。目前,在普通小麦背景下,已经创建出整套的普通小麦-长穗偃麦草附加系及代换系,但还未有全套的硬粒小麦-长穗偃麦草附加系和代换系。本研究旨在将长穗偃麦草染色体导入小麦背景,培育硬粒小麦-长穗偃麦草附加系和普通小麦-长穗偃麦草易位系,具体结果如下:(1)利用多种鉴定方法从硬粒小麦Langdon(AABB)与小偃麦8801(AABBEE)杂交后代群体中选育出硬粒小麦-长穗偃麦草2E、4E单体附加系,两个附加系连续三年自交后代中均未发现纯合的双体附加系。两个附加系中阳性单株的花粉母细胞减数分裂过程中均存在染色体分离落后和微核现象,发生在后期Ⅰ、Ⅱ和末期Ⅱ及四分体时期。(2)两个附加系分别与硬粒小麦进行正反杂交,以2E、4E染色体分子标记对杂交后代进行PCR扩增,硬粒小麦背景中长穗偃麦草2E、4E染色体经雄配子的传递率分别为4.41%、2.17%,但未见2E、4E染色体通过雌配子传递。(3)60Co-γ射线辐射易位系TW7BS·7EL的花粉后与扬麦158杂交获得M,从M1与扬麦158回交后代BC1F2中通过长穗偃麦草7EL特异分子标记及基因组原位杂交技术,鉴定出7种类型的携带长穗偃麦草7EL染色体片段的易位。根据7EL染色体易位片段不同的断点,将48个分子标记定位在长穗偃麦草7EL染色体的不同区间。对7种类型的易位进行两年的赤霉病抗性鉴定表明,TL1、TL2和TL5具有类似于苏麦3号的较高赤霉病抗性水平,初步认为这三个易位的片段中含有抗赤霉病基因,而TL3、TL4和TL6表现为中感,说明这三个易位片段中没有抗赤霉病基因。
孔令娜[8](2017)在《一整套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的选育与鉴定》文中进行了进一步梳理不断加强小麦种质创新,丰富小麦基因资源,对于小麦的遗传改良和育种具有十分重要的意义。纤毛鹅观草[Roegneria ciliaris(Trin.)Nevski,2n=4x=28,ScScYcYc]是小麦的一种野生四倍体近缘植物,具有抗赤霉病、抗条纹花叶病、抗大麦黄矮病、耐寒耐旱、多花多粒性等优良特性,是小麦种质改良的重要遗传资源。培育小麦-纤毛鹅观草异附加系是进行小麦育种改良的重要中间环节,对这些异附加系进行分子细胞遗传学鉴定以及性状评价,有利于充分挖掘、转移和定位纤毛鹅观草的有益基因,同时可以开展纤毛鹅观草与小麦之间的比较基因组学研究。本研究在前人研究的基础上,利用普通小麦中国春与Inayamakomugi-纤毛鹅观草双二倍体的回交自交群体,通过细胞学观察、原位杂交(GISH、FISH)、分子标记等分子细胞遗传学鉴定技术,选育一整套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系,开发纤毛鹅观草染色体特异分子标记,对异附加系进行农艺性状和抗病性状调查,筛选携带纤毛鹅观草优异基因的小麦新种质。取得的主要研究成果如下:1、一套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的配套选育在前人已选育的7个普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的基础上,利用新构建的普通小麦Ik-纤毛鹅观草双二倍体和中国春的回交自交后代群体,通过分子标记PCR鉴定和顺次GISH/FISH分析,选育并鉴定出其余7个涉及纤毛鹅观草不同染色体的二体异附加系(DA2Yc、DA3Yc、DA4Sc、DA4Yc、DA5Sc、DA6Sc、DA6Yc),首次获得了 一整套(14个)普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系。2、纤毛鹅观草染色体基于DNA重复序列的FISH分析依次利用纤毛鹅观草基因组DNA为探针,中国春基因组DNA做封阻进行GISH(genomic in situ hybridization),利用重复序列pAs1、pSc119.2 和45S rDNA作探针进行FISH(fluorescent in situ hybridization),对纤毛鹅观草染色体以及一套普通小麦-纤毛鹅观草异附加系中外源染色体进行顺次GISH/FISH分析。结果显示pAs1在纤毛鹅观草1Sc、2Sc、3Sc、4Sc、6Sc、7Sc 以及 1Yc、2Yc、4Yc、7Yc等 10 对染色体上检测到杂交信号,且信号位点较为丰富,主要分布于染色体的末端、亚末端和中部,其中2Sc、7Sc和4Yc只在长臂上有信号,其余染色体的长、短臂均有信号分布。pSc119.2在一套异附加系中的纤毛鹅观草染色体上均未检测到明显的杂交信号。45S rDNA在纤毛鹅观草1Sc和5Sc染色体的短臂上检测到杂交信号,可以分别作为1Sc和5Sc特异的细胞学标记。由于纤毛鹅观草3Yc、5Yc和6Yc染色体上均未检测到pAs1、pSc119.2和45S rDNA的杂交信号,还需要利用更多的细胞学标记加以区分。3、筛选和开发纤毛鹅观草各条染色体的特异分子标记为了快速且准确地鉴定小麦背景中的纤毛鹅观草染色体或片段,本研究选取定位于小麦七个部分同源群染色体上的1845对EST标记,在亲本普通小麦中国春、Inayama komugi、普通小麦Ik-纤毛鹅观草双二倍体和纤毛鹅观草之间进行扩增,筛选可以特异追踪纤毛鹅观草各条染色体的分子标记。共筛选到纤毛鹅观草染色体特异分子标记557个,从中选取每一部分同源群上分布均匀、扩增稳定的特异分子标记在亲本和一套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系中进行扩增,结果筛选到纤毛鹅观草各条染色体的专化分子标记107个,其中1Sc专化标记22个,1Yc专化标记3个;2Sc专化标记3个,2Yc专化标记7个;3Sc专化标记2个,3Yc专化标记6个;4Sc专化标记12个,4Yc专化标记7个;5Sc专化标记6个,5Yc专化标记12个;6Sc专化标记9个,6Yc专化标记9个;7Sc专化标记1个、7Yc专化标记8个。此外,还开发了纤毛鹅观草每个部分同源群上可同时区分Sc和Yc染色体的特殊专化标记54个,各个部分同源群筛选到的特殊专化标记数量分别为2个、8个、10个、13个、3个、17个和1个。利用这些专化标记对前人所选育的异附加系材料进行准确鉴定,明确了其中外源染色体的具体身份。4、普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的性状鉴定为了充分挖掘和利用纤毛鹅观草更多的有益基因,本研究在2012-2016年度间对普通小麦-纤毛鹅观草双二倍体及一套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系进行了赤霉病、白粉病、黄花叶病和锈病等小麦几个主要病害的抗病性鉴定以及农艺性状调查。四年赤霉病抗性鉴定结果表明,双二倍体对赤霉病表现出稳定抗性,二体异附加系DAISc(3 年鉴定结果)、DA1Yc、DA2Yc、DA3Sc(高抗)(3 年鉴定结果)、DA4Sc、DA5Yc和DA6Sc对赤霉病表现出较好的抗性;四年白粉病田间成株期抗性鉴定结果表明,双二倍体表现稳定抗性,DA1Sc(3年鉴定结果)、DA2Sc、DA2Yc、DA3Yc(3年鉴定结果)、DA5Sc、DA5Yc和DA6Sc均表现出中等抗性;三年田间抗黄花叶病鉴定结果表明,双二倍体和Inayamakomugi均表现高抗,DA5Sc(1年鉴定结果)和DA6Sc对黄花叶病的抗性表现与双二倍体相近;两年叶锈病田间成株期抗性鉴定结果表明,双二倍体表现抗病,DA5Yc和DA6Sc对叶锈病也表现中抗。综合以上结果发现,二体异附加系DA1Sc、DA5Sc、DA5Yc和DA6Sc兼抗2种以上小麦病害,可以作为小麦抗病育种的优异种质资源。通过田间观察和农艺性状调查,涉及不同纤毛鹅观草染色体的二体异附加系其表型表现出明显差异,其中一些表型特征可以作为形态学标记对纤毛鹅观草异附加系材料进行初步鉴定。
戴毅[9](2017)在《小麦—黑麦—偃麦草三属杂种种质创制及分子细胞遗传学研究》文中提出我国小麦育种研究正处在一个“瓶颈”阶段,育成品种综合抗性普遍较差,已制约小麦遗传改良水平的提高,其原因与种质资源单一、遗传基础狭窄、资源深度挖掘不够、重产量轻品质的育种现状有关。种质资源创制是小麦遗传改良的重要基础,而小麦野生近缘植物中蕴含许多对小麦遗传改良的有益基因,如抗生物胁迫和抗非生物胁迫基因,但目前栽培小麦仅利用了其野生近缘种基因库中10%~15%的基因资源。通过利用具有育种价值的优异野生近缘物种,创制一批超高产、抗病虫害(尤其是抗赤霉病)、抗逆性强等新种质,对拓宽小麦种质资源遗传基础、减少骨干品种反复使用和丰富抗源单一化现状具有重要意义,有利于突破小麦育种的“瓶颈”,培育出综合抗性优良的小麦高产新品种。小黑麦(Triticale)是人工创造的新物种,结合了小麦和黑麦籽粒产量与品质两方面的优良特性,具有抗寒、抗病、抗逆性强等优势,但与小麦一样对赤霉病(Fusarium head blight)的抗性并非十分出色。长穗偃麦草(Thinopyrum elongatum)是重要的小麦野生近缘种,具有生长繁茂、多花多实、高光效、抗病、耐盐碱、耐干旱等优良特性,在抗小麦赤霉病方面尤为突出,是小麦遗传改良中具有重要价值的优异外源基因供体。本研究利用六倍体小黑麦(AABBRR)与硬粒小麦-长穗偃麦草双二倍体(AABBEE)杂交,通过胚拯救技术获得杂种并在其自交后代中选择小麦-黑麦-偃麦草三属杂种材料;利用高通量测序的SLAF-seq技术,开发大量黑麦、长穗偃麦草染色体特异分子标记;并将细胞遗传学、原位杂交与染色体特异标记结合,鉴定三属杂种材料的染色体组成;对获得的三属杂种稳定株系进行抗赤霉病、叶锈病和秆锈病(Ug99)鉴定,为小麦抗病育种创制抗病性强的新种质。主要研究结果如下:1、利用包含不同属的双二倍体间杂交和胚拯救技术获得三属杂种的效率最高。六倍体小黑麦(AABBRR)与六倍体硬粒小麦-长穗偃麦草双二倍体(AABBEE)杂交经胚拯救获得F1植株,染色体数目和基因组原位杂交证实F1植株含有全套A、B组染色体,并附加7条黑麦R组染色体和7条长穗偃麦草E组染色体。对F1植株自交产生的F2、F4和F5代材料进行染色体数目及农艺性状调查,发现杂种后代染色体持续分离,重组类型多,表型变异丰富。14株F2植株中染色体数目各不相同,且都大于2n=40;在F4和F5代中染色体数目分布范围为2n=28-56之间,2n=40-44之间出现频率最高,其中染色体数目为2n=42的植株最多。F4代后的部分植株表型上偏向长穗偃麦草特征,而部分植株和小黑麦类似,这与细胞中长穗偃麦草和黑麦染色体的多少密切相关。本研究将基因组荧光原位杂交(GISH)、非变性荧光原位杂交(ND-FISH)、染色体特异分子标记及抗病性鉴定相结合,比较系统的、快速的、准确的鉴定出杂交后代中外源染色体的组成,并筛选出具有抗性的三属杂种种质。2、基于SLAF-seq(Specific Length Amplified Fragment Sequencing)技术,获得大量黑麦、长穗偃麦草染色体特异的DNA片段序列,并以此序列设计引物获得黑麦和长穗偃麦草各染色体特异分子标记。在黑麦中共设计350对引物,通过PCR获得253对黑麦特异标记,成功率为72.29%(253/350),其中44对是基因组特异性标记,33对为多条染色体特异标记,176对为各单条染色体特异标记,这些单条染色体标记及基因组标记开发效率为62.86%(220/350)。在长穗偃麦草中共设计525对引物用于开发特异性分子标记,通过PCR获得280个长穗偃麦草特异标记,成功效率为53.33%(280/525),其中,49对为基因组特异标记,151对为单条染色体特异标记,其开发效率为38.10%(200/525)。本研究开发的这些标记具有明显的特异性和可靠的稳定性,可以用来检测小麦-黑麦-偃麦草三属杂种中黑麦和长穗偃麦草的各染色体,提高了三属杂种中染色体组成鉴定的准确性和效率,为在小麦抗性育种中利用小麦-黑麦-偃麦草三属杂种资源,鉴定其外源染色体(染色体片段)提供可靠的特异分子标记。3、在小麦野生近缘物种与小麦间的远缘杂交后代中,鉴定外源染色体以及染色体组成变化是十分必需的。本研究根据结实率以及染色体数目调查结果筛选了8个染色体数目大于40的株系,利用染色体特异分子标记和GISH对这些株系进行染色体组成鉴定。染色体特异分子标记和GISH鉴定染色体组成的结果完全一致。4个株系(RE24-1,RE26-1,RE26-2和RE33-3)含有所有黑麦染色体,没有长穗偃麦草染色体;株系RE36-1含有除了2R染色体之外的12条黑麦染色体,没有长穗偃麦草染色体;株系RE33-2具有所有黑麦染色体,并含有1条1R/1E易位染色体;RE62-1具有12条黑麦染色体,并含有2条5R/5E易位染色体;株系RE24-4仍然不稳定,在F6代此株系染色体组成包含硬粒小麦A、B组所有染色体和12条黑麦R染色体(缺7R),1条长穗偃麦草7E染色体以及1条7R/7E易位染色体(2n=7ⅡA+7Ⅱb+6ⅡR+11Ⅰ7E+1Ⅰ7R/7E=42)。同时,发现黑麦染色体在三属杂种后代中较多,表明黑麦染色体比长穗偃麦草染色体与小麦近缘关系更近、亲和性更好,更容易在小麦背景中存在而传递给后代。在自然的三属杂种中,小麦染色体组表现完整,外源种质组成的染色体组内的染色体是由不同种质的部分同源群染色体组成,相同部分同源群染色体不能同时存在。染色体的易位发生在同一部分同源群内染色体之间。4、运用GISH、ND-FISH以及染色体特异分子标记鉴定2个株系RE21和RE62染色体组成。结果发现2个株系染色体数目均为2n=42,且染色体组成稳定。株系RE21中,小麦A、B组染色体完整,外源染色体包括长穗偃麦草IE、2E、3E和5E染色体以及黑麦4R、6R和7R染色体;株系RE62中,小麦A、B组染色体完整,外源染色体为1R-4R、6R-7R完整染色体,以及5R/5E易位染色体。对2个株系进行赤霉病、叶锈病和秆锈病(Ug99)抗性鉴定,株系RE21对赤霉病、叶锈病和秆锈病(Ug99)都具有抗性,尤其表现高抗赤霉病;株系RE62对赤霉病易感,但对叶锈病和Ug99表现抗性。2个稳定株系的抗病性表明,三属杂种中外源染色体存在抗病基因,如将该外源染色体转移到小麦背景中,并利用染色体特异分子标记进行辅助选择,将有利于培育新的抗病小麦品种。
李浩[10](2016)在《小麦中未减数配子介导的异源多倍体化的研究》文中认为多倍体化是伴随植物进化的重要驱动力,对于植物进化和改良发挥着重要的作用。小麦族的起源涉及到了种间或属间杂种化,随后经过染色体组加倍,通过未减数配子结合的自发染色体加倍被认为是普通小麦起源的重要途径。未减数配子在一些小麦(主要是四倍体小麦)和近缘种属间的远缘杂种F1和多单倍体中都有报道,并且被成功用于合成许多异源多倍体材料。因此,丰富四倍体小麦的细胞学工具材料并用于探究远缘杂交材料中未减数配子的产生过程具有重要意义;探究利用未减数配子合成的人工六倍体小麦和小黑麦的多倍体化过程,有助于阐释小麦族的演化历程;利用未减数配子合成新型的异源多倍体材料,对于普通小麦的遗传改良也具有重要的应用价值。本论文利用转育的硬粒小麦DR147的重双端体,揭示了四倍体小麦一些独特的遗传特性;分析了重双端体和黑麦的杂种F1的减数分裂过程,阐释了其未减数配子产生的路径,揭示了不同重双端体对杂种F1减数分裂过程的影响;对未减数配子介导合成的六倍体小黑麦和人工合成六倍体小麦,利用基因组原位杂交、荧光原位杂交(FISH)、分子标记等分子、细胞遗传学技术阐释其合成和演化过程,揭示了异源多倍化过程中的染色体组变化。主要研究结果如下:1、鉴定了12个硬粒小麦DR147遗传背景的重双端体(不包括d Dt2B和d Dt3A),利用p Asl和p Hv G38作探针建立了DR147的FISH核型模式图,随后利用着丝粒探针(6C6)、p Asl和p Hv G38对重双端体系进行核型鉴定和正确的注释。这些重双端体系均表现出与DR147相似的表型特征,而d Dt6B却表现出了独特的无芒特性,该表型是由于6BL端体上带有来自于普通小麦中国春的芒长抑制基因B2引起的,该位点具有部分显性特性。d Dt6B遗传背景的微卫星标记分析表明,端体染色体6BL和6BS都独特的保留了部分中国春的遗传背景,根据6BL的遗传和物理图谱,将B2位点定位到缺失系6BL-5和6BL-6的中间缺失的远端区域之间,临近Xwmc539,Xgpw5130和Xwmc748三个标记。2、将四倍体小麦DR147及其遗传背景的重双端体与黑麦进行杂交,利用胚拯救获得了远缘杂种F1。杂种F1代的减数分裂研究表明,不同组合的减数分裂过程不同,1A、6A、3B、4B的端体染色体能够较明显地促进部分同源染色体的配对,7B端体染色体影响了减数分裂中单价体染色体的浓缩程度;证实了第一次减数分裂的核再组(FDR)、姊妹染色单体的提前分离(SDM)以及提前的细胞质分裂都可能是四倍体小麦×黑麦杂种F1代中未减数配子产生的方式;分别利用禾本科植物染色体特异着丝粒探针6C6和黑麦染色体特异的着丝粒探针p AWRC1进行FISH,发现FDR类型花粉母细胞在第一次减数分裂中期时单价体染色体的动粒是以两极导向的方式附着纺锤丝;证明了减数分裂后形成的二分体的确是未减数分裂的产物。因而,本研究为四倍体小麦×黑麦远缘杂种后代F1代的减数分裂历程和未减数配子的产生路径提供了充实的依据。3、以二粒小麦MY3478与粗山羊草SY41杂交后代经过未减数配子的作用自然合成了六倍体小麦NA0928的S0-S3世代为材料,细胞学和微卫星标记检测发现,NA0928的早期世代中存在丰富的染色体水平和微卫星水平的变异,证实了未减数配子介导的异源多倍化过程中剧烈的基因组变异,包括整条染色体的丢失或增加,带有端体的非整倍体,染色体特异重复序列的丢失(FISH表明),微卫星重复单元序列的消除(测序表明),其中S0和S1世代微卫星位点的突变率分别达到3.17×10-2和8.85×10-3。发现MY3478是具有仅次于LDN而优于PS5未减数配子产生能力的新种质,并且成功的把白粉病抗性基因从SY41转入了人工合成小麦,为小麦品种改良研究提供了有益的抗性资源。4、以普通小麦M8003×rye后代中自发衍生出了表型差异很大的六倍体小黑麦N9116H和N9116M为材料,连续的FISH和GISH核型表明二者都保留了A、B和R基因组的染色体,而D基因组的染色体已全部丢失。在两个小黑麦中都检测到了5A和7B染色体的变异,只在N9116H中检测到了5B和7A染色体的变异,在一株N9116M中检测到了重置的2A染色体,然而未检测到黑麦染色体的变异。两个小黑麦中都观察到了减数分裂过程中染色体行为的不同步,在第一次减数分裂中期能够观察到很多单价体染色体的存在;贮藏蛋白的变异也很丰富,尤其是在高、低分子量麦谷蛋白和黑麦碱区域。证实了普通小麦和黑麦的杂交后代中,黑麦的基因组能够抑制小麦基因组的稳定性,基因组的动荡是剧烈发生的,全部D基因组染色体能够发生完全消除,并且诱发小麦A、B组染色体的结构变异以及编码贮藏蛋白的功能差异。此外,N9116H和N9116M均表现出了良好的白粉病和条锈病的抗性,可以作为小麦抗性改良的抗源材料。
二、硬粒小麦-簇毛麦双二倍体与普通小麦杂种F_1的花粉母细胞减数分裂行为的研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、硬粒小麦-簇毛麦双二倍体与普通小麦杂种F_1的花粉母细胞减数分裂行为的研究(论文提纲范文)
(1)5份小麦-华山新麦草衍生后代的分子细胞遗传学鉴定及重要农艺性状评价(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
第一章 文献综述 |
1.1 中国的小麦育种 |
1.1.1 小麦育种历程 |
1.1.2 育种取得的主要进展 |
1.1.3 我国小麦育种面临的问题 |
1.2 小麦远缘杂交进展 |
1.2.1 小麦的近缘属种 |
1.2.2 小麦远缘杂交的亲和性 |
1.2.3 外源物质向小麦中的转移方式 |
1.2.4 小麦中外源物质的检测 |
1.2.5 远缘杂交在小麦改良中的作用 |
1.3 华山新麦草研究进展 |
1.3.1 新麦草属介绍 |
1.3.2 华山新麦草的利用价值 |
1.3.3 华山新麦草的远缘杂交研究进展 |
1.4 本研究的目的意义及内容 |
1.4.1 本研究的目的和意义 |
1.4.2 研究内容 |
第二章 华山新麦草染色体核型分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 实验材料 |
2.1.2 根尖材料的获得与处理 |
2.1.3 根尖染色体制片 |
2.1.4 核型分析及染色体模式图的绘制 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 华山新麦草的染色体图分析 |
2.2.2 华山新麦草的染色体核型模式图分析 |
2.3 讨论 |
第三章 小麦-华山新麦草后代DH5和DH88的分子细胞遗传学鉴定 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 实验材料 |
3.1.2 细胞学观察 |
3.1.3 植物基因组总DNA的获得 |
3.1.4 基因组原位杂交(GISH)分析 |
3.1.5 多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
3.1.6 分子标记分析 |
3.1.7 来自华山新麦草基因组特异条带的分析和SCAR标记开发 |
3.1.8 田间农艺性状调查 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 DH5和DH88的细胞学观察 |
3.2.2 DH5和DH88的GISH鉴定 |
3.2.3 DH5和DH88的FISH鉴定 |
3.2.4 DH5和DH88的EST-STS分子标记分析 |
3.2.5 华山新麦草基因组特异SCAR标记开发与验证 |
3.2.6 DH5和DH88的农艺性状分析 |
3.3 讨论 |
第四章 小麦-华山新麦草后代DH66的分子细胞遗传学鉴定 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 实验材料 |
4.1.2 细胞学观察 |
4.1.3 顺序FISH/GISH技术 |
4.1.4 小麦15K SNP芯片分析 |
4.1.5 分子标记(EST-STS、SSR和 SCAR)分析 |
4.1.6 农艺性状调查 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 DH66的细胞学观察 |
4.2.2 DH66的多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
4.2.3 DH66的15K SNP芯片分析 |
4.2.4 DH66的分子标记分析 |
4.2.5 DH66的农艺性状评价 |
4.3 讨论 |
第五章 小麦-华山新麦草后代TR77分子细胞遗传学的鉴定 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 实验材料 |
5.1.2 细胞学观察 |
5.1.3 基因组原位杂交GISH技术 |
5.1.4 多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
5.1.5 小麦15K SNP育种芯片 |
5.1.6 分子标记分析 |
5.1.7 农艺性状调查 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 TR77的细胞学观察 |
5.2.2 TR77的分子标记分析 |
5.2.3 TR77的多色荧光原位杂交(Mc-FISH)分析 |
5.2.4 TR77的SNP芯片分析 |
5.2.5 TR77的田间表型和白粉病抗性分析 |
5.3 讨论 |
第六章 小麦—华山新麦草后代DH109和小麦—滨麦后代DM131 之间的异同性分析 |
6.1 材料与方法 |
6.1.1 实验材料 |
6.1.2 细胞学观察 |
6.1.3 分子标记分析 |
6.1.4 顺序FISH/GISH分析 |
6.1.5 小麦55K SNP育种芯片 |
6.1.6 抗病性及农艺性状调查 |
6.2 结果与分析 |
6.2.1 DH109和DM131的细胞学观察 |
6.2.2 DH109和DM131的GISH分析 |
6.2.3 DH109和DM131的分子标记分析 |
6.2.5 DH109和DM131的55K SNP芯片分析 |
6.2.6 DH109和DM131的抗病性分析和农艺性状差异 |
6.3 讨论 |
第七章 结论与创新点 |
7.1 结论 |
7.2 创新点 |
7.3 展望 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
作者简介 |
(2)普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生后代的分子细胞遗传学研究及特异标记开发(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
第一章 文献综述 |
1.1 小麦的起源和进化 |
1.1.1 小麦族分类 |
1.1.2 小麦的起源和进化 |
1.2 小麦远缘杂交研究 |
1.2.1 小麦远缘杂交特性 |
1.2.2 外源遗传物质的转移 |
1.2.3 外源染色质的检测 |
1.2.4 染色体工程育种进展 |
1.3 偃麦草属研究进展 |
1.3.1 偃麦草属系统分类研究 |
1.3.2 偃麦草属染色体组成及同源性分析 |
1.3.3 十倍体长穗偃麦草远缘杂交研究进展 |
1.4 外源遗传物质导入对小麦的影响 |
1.4.1 染色体结构变异 |
1.4.2 基因表达变化 |
1.5 基于测序技术的染色体研究进展 |
1.5.1 基因组 |
1.5.2 转录组 |
1.6 本研究的目的和意义 |
第二章 十倍体长穗偃麦草染色体核型及亲缘关系分析 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 实验材料和处理 |
2.1.2 染色体组型计算及判定原则 |
2.1.3 多态性检测 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 十倍体长穗偃麦草染色体组型分析 |
2.2.2 十倍体长穗偃麦草亲缘关系分析 |
2.3 讨论 |
第三章 9个小麦-十倍体长穗偃麦草部分双二倍体的分子细胞学鉴定 |
3.1 材料及方法 |
3.1.1 实验材料和处理 |
3.1.2 细胞统计学分析 |
3.1.3 原位杂交鉴定 |
3.1.4 农艺性状调查及谷物含量分析 |
3.1.5 抗病性评估 |
3.1.6 分子标记分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 部分双二倍体的形态学和细胞学观察 |
3.2.2 部分双二倍体的原位杂交鉴定 |
3.2.3 部分双二倍体的分子标记鉴定 |
3.2.4 部分双二倍体的抗病性调查 |
3.2.5 部分双二倍体的谷物相关品质分析 |
3.3 讨论 |
第四章 7个小麦-十倍体长穗偃麦草异代换系的分子细胞遗传学研究 |
4.1 材料及方法 |
4.1.1 实验材料 |
4.1.2 细胞统计学分析 |
4.1.3 原位杂交鉴定 |
4.1.4 农艺性状调查及谷物含量分析 |
4.1.5 抗病性评估 |
4.1.6 分子标记鉴定 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 3个二体异代换系的鉴定 |
4.2.2 4个双重异代换系的鉴定 |
4.3 讨论 |
第五章 基于SLAF-seq的十倍长穗偃麦草特异分子标记开发 |
5.1 材料及方法 |
5.1.1 实验材料 |
5.1.2 实验流程 |
5.1.3 分析方案 |
5.1.4 特异分子标记检测 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 生物信息学结果展示 |
5.2.2 十倍体长穗偃麦草基因注释分析 |
5.2.3 十倍体长穗偃麦草特异标记开发及应用 |
5.2.4 1J~S染色体标记开发和应用 |
5.3 讨论 |
第六章 结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简历 |
(3)硬粒小麦-中间偃麦草杂种后代的分子细胞遗传学研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 硬粒小麦远缘杂交的研究 |
1.1.1 小麦远缘杂交的意义 |
1.1.2 硬粒小麦远缘杂交的亲本选配 |
1.2 硬粒小麦-偃麦草新种质研究 |
1.2.1 硬粒小麦-中间偃麦草杂交后代的应用 |
1.2.2 硬粒小麦-长穗偃麦草杂交后代的应用 |
1.2.3 硬粒小麦-佰萨偃麦草杂交后代的应用 |
1.3 小麦族外源染色体鉴定 |
1.3.1 形态学检测 |
1.3.2 细胞学鉴定 |
1.3.3 分子标记 |
1.3.4 基因组原位杂交 |
1.4 本论文研究的目的与意义 |
1.5 研究技术路线 |
第2章 形态学检测 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 形态学分析 |
2.3.2 割后再生性和抗寒性检测 |
2.4 结果与分析 |
2.4.1 亲本形态学检测结果 |
2.4.2 2019 年杂交结果统计 |
2.4.3 杂种F_1形态学检测 |
2.4.4 杂种F_2形态学检测 |
2.5 讨论 |
2.6 本章小结 |
第3章 细胞学鉴定 |
3.1 引言 |
3.2 实验材料 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 根尖体细胞染色体制片及检测 |
3.3.1.1 实验材料预处理 |
3.3.1.2 常规染色体制片 |
3.4 实验仪器及设备 |
3.5 结果与分析 |
3.5.1 亲本体细胞染色体鉴定 |
3.5.2 杂种F_1体细胞染色体鉴定 |
3.5.3 杂种F_2体细胞染色体鉴定 |
3.6 讨论 |
3.7 本章小结 |
第4章 分子标记检测 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 植物基因组总DNA的提取 |
4.3.2 DNA浓度的测量 |
4.3.3 通用引物检测 |
4.4 实验设备及仪器 |
4.5 结果与分析 |
4.5.1 2P1P2 通用引物分子标记检测 |
4.5.2 E染色体组通用引物P3P4 分子标记检测 |
4.5.3 St染色体组通用引物St_(542)分子标记检测 |
4.6 讨论 |
4.7 本章小结 |
第5章 基因组原位杂交 |
5.1 引言 |
5.2 实验材料 |
5.3 实验方法 |
5.3.1 植物总DNA提取 |
5.3.2 标记探针 |
5.3.3 原位杂交流程 |
5.4 实验设备及仪器 |
5.5 结果与分析 |
5.5.1 杂种F_1中间偃麦草总基因组探针原位杂交检测结果 |
5.5.2 杂种F_1J基因组探针原位杂交检测结果 |
5.6 讨论 |
5.7 本章小结 |
结论 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
致谢 |
(4)江苏省植物细胞遗传学研究回顾与展望(论文提纲范文)
1 小麦分子细胞遗传学及其应用 |
1.1 小麦及近缘物种染色体鉴定技术 |
1.2 小麦–远缘新种质创制与利用 |
2 水稻分子细胞遗传学及其应用 |
2.1 水稻染色体鉴定技术 |
2.2 水稻染色体生物学 |
2.3 稻属远缘新种质创制 |
3 甜瓜属分子细胞遗传学及其应用 |
3.1 甜瓜属染色体鉴定技术 |
3.2 甜瓜属物种起源与进化 |
3.3 甜瓜属物种种质创新 |
4 棉花分子细胞遗传学及其应用 |
4.1 棉花染色体鉴定技术 |
4.2 棉花染色体生物学 |
4.3 棉花远缘杂交与新种质创制 |
5 菊花分子细胞遗传学及其应用 |
5.1 菊属染色体鉴定技术 |
5.2 菊属起源与演化 |
5.3 菊属远缘杂交与种质创新 |
6 杨树分子细胞遗传学及其应用 |
6.1 杨树分子细胞遗传学技术 |
6.2 杨树性染色体的分子细胞遗传学 |
7 甘薯分子细胞遗传学及其应用 |
7.1 甘薯染色体鉴定技术 |
7.2 甘薯起源与进化 |
7.3 甘薯远缘杂交和种质创新 |
8 植物分子细胞遗传学研究展望 |
说明 |
(5)簇毛麦6V#4S特异标记连锁图谱建立与小麦染色体新易位系创制(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
主要符号对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 簇毛麦及其优良基因 |
1.2 小麦异源易位系的诱导 |
1.2.1 电离辐照 |
1.2.2 Ph基因突变体 |
1.2.3 组织培养 |
1.2.4 杀配子染色体 |
1.3 外源染色体片段的鉴定 |
1.3.1 分子标记 |
1.3.2 原位杂交 |
1.4 本研究的目的和意义 |
1.5 技术路线 |
第二章 PmV/Pm21基因及小麦6AS和6DS特异分子标记的开发 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 植物材料 |
2.1.2 主要试剂 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 分子标记开发 |
2.2.2 DNA提取 |
2.2.3 小麦6AS、6DS特异分子标记的初步筛选 |
2.2.4 小麦6AS、6DS特异分子标记的验证 |
2.3 结果分析 |
2.3.1 特异于基因PmV和Pm21的分子标记开发 |
2.3.2 小麦6AS和6DS染色体的特异分子标记开发 |
2.4 讨论 |
第三章 CSph1b背景下不同簇毛麦6V间及其与小麦第六同源群染色体间易位系的诱导与鉴定 |
3.1 实验材料 |
3.1.1 植物材料 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 引物序列 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 基因组DNA提取 |
3.2.2 基因组DNA提取质量检测 |
3.2.3 特异分子标记检测 |
3.2.4 基因组原位杂交鉴定 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 小麦-中国春突变体变异群体的创建 |
3.3.2 新易位系的分子标记筛选鉴定 |
3.3.3 新易位系的GISH鉴定 |
3.4 讨论 |
3.4.1 Ph系统诱导部分同源染色体易位 |
3.4.2 分子标记及GISH技术在新的易位系鉴定中的作用 |
3.4.3 新的易位类型6V#4S·6AL易位系 |
第四章 辐射诱导簇毛麦6VS与小麦染色体间易位及其鉴定 |
4.1 实验材料 |
4.1.1 植物材料 |
4.1.2 主要试剂 |
4.1.3 引物序列 |
4.2 试验方法 |
4.2.1 辐射处理 |
4.2.2 基因组DNA提取 |
4.2.3 特异分子标记检测 |
4.2.4 基因组原位杂交鉴定 |
4.2.5 辐射处理当代植株农艺性状性调查 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 对辐射M_0代进行育性调查和M_1代表型鉴定 |
4.3.2 不同辐射剂量处理后的F_1代出苗率和结实率统计 |
4.3.3 对杂种F_1代和F_2代进行分子标记筛选 |
4.3.4 对F_2代小片段材料进行基因组原位杂交鉴定 |
4.3.5 对小片段易位系后代的抗病性鉴定 |
4.4 讨论 |
第五章染色体6V#2和6V#4的配对、交换与分子标记遗传连锁图谱的建立 |
5.1 实验材料 |
5.1.1 植物材料 |
5.1.2 主要试剂 |
5.1.3 引物序列 |
5.2 试验方法 |
5.2.1 F_2分离群体的构建 |
5.2.2 基因组DNA提取 |
5.2.3 特异分子标记检测 |
5.2.4 基因组原位杂交鉴定 |
5.2.5 遗传连锁图谱和物理图谱的绘制 |
5.3 结果与分析 |
5.3.1 外源染色体6V#2和6V#4在杂种F_1花粉母细胞中的配对及分离 |
5.3.2 9个6VS特异的分子标记在异代换系杂交F_2群体中的分离 |
5.3.3 6AS/6DS特异的分子标记对F_2群体中A和 D染色体的检测 |
5.3.4 6VS遗传连锁图谱的构建及共线性分析 |
5.4 讨论 |
5.4.1 6V#2和6V#4在杂种后代中发生配对和交换 |
5.4.2 新型异代换系的分子标记筛选 |
5.4.3 遗传连锁图谱对缺乏基因组信息的种属的重要性 |
第六章 全文结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(6)小麦-茸毛偃麦草新型渐渗系的分子细胞遗传学解析(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 绪论 |
1.1 小麦远缘杂交概述 |
1.1.1 远缘杂交在小麦遗传改良中的应用 |
1.1.2 三属杂种在小麦遗传改良中的应用 |
1.1.3 小麦近缘物种抗锈病基因研究进展 |
1.2 小麦染色体工程概述 |
1.2.1 小麦-近缘物种中间材料的创制 |
1.2.2 小麦-外源染色体易位系的创制 |
1.3 远缘杂交后代的鉴定 |
1.3.1 形态学标记鉴定 |
1.3.2 细胞学标记识别 |
1.3.3 原位杂交识别 |
1.3.4 分子标记检测 |
1.4 中间偃麦草应用价值 |
1.4.1 中间偃麦草在小麦遗传改良中的应用 |
1.4.2 茸毛偃麦草研究进展 |
1.4.3 中间偃麦草抗病基因的挖掘 |
1.5 色素相关基因应用价值 |
1.5.1 花青素重要功能 |
1.5.2 小麦近缘物种色素相关基因研究进展 |
1.6 论文设计 |
1.6.1 研究目的及意义 |
1.6.2 研究内容 |
第二章 小麦-黑麦-茸毛偃麦草三属杂种后代的细胞遗传学分析 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 植株材料 |
2.2.2 研究方法 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 小麦-茸毛偃麦草部分双二倍体TE1508 的细胞学分析 |
2.3.2 六倍体小黑麦Currency的细胞学分析 |
2.3.3 外源染色体在三属杂种自交后代的传递率 |
2.4 讨论 |
2.4.1 三属杂种后代外源染色体传递行为 |
2.4.2 偃麦草Js-2 染色体与小麦4B染色体亲缘关系的推测 |
2.4.3 多寡聚核苷酸探针在原位杂交分析中的重要性 |
2.4.4 小麦三属杂种应用价值 |
2.5 本章小结 |
第三章 小麦-茸毛偃麦草代换系4J(4B)和4J~s(4B)的鉴定及抗性评估 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 植株材料 |
3.2.2 研究方法 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的细胞学鉴定 |
3.3.2 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的分子标记分析 |
3.3.3 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的抗病性分析 |
3.3.4 小偃麦衍生系X24C-10与X24C-5 的农艺性状调查 |
3.4 讨论 |
3.4.1 茸毛偃麦草染色体4J与4J~s的应用价值 |
3.4.2 4J~s染色体对小麦品种改良的优势评估 |
3.5 本章小结 |
第四章 小麦-茸毛偃麦草附加系2J~s和3J的分子细胞遗传学分析 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 植株材料 |
4.2.2 研究方法 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的细胞学鉴定 |
4.3.2 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的分子标记分析 |
4.3.3 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的抗病性分析 |
4.3.4 小偃麦衍生系X24C-14与A1082 的农艺性状调查 |
4.4 讨论 |
4.4.1 茸毛偃麦草2J~s染色体的应用价值 |
4.4.2 茸毛偃麦草3J染色体的应用价值 |
4.5 本章小结 |
第五章 小麦-茸毛偃麦草异源易位系的鉴定及优异基因挖掘 |
5.1 引言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 植株材料 |
5.2.2 研究方法 |
5.3 结果与分析 |
5.3.1 小麦-茸毛偃麦草T4BS·4JL易位系的鉴定 |
5.3.2 小麦-茸毛偃麦草T4BS·5J~sL易位系的鉴定 |
5.4 讨论 |
5.4.1 ThMYB4J转录因子的研究价值 |
5.4.2 茸毛偃麦草5J~s染色体的应用价值 |
5.5 本章小结 |
第六章 偃麦草7J染色体苗期胚芽鞘紫色基因的分子细胞遗传学定位 |
6.1 引言 |
6.2 材料与方法 |
6.2.1 植株材料 |
6.2.2 研究方法 |
6.3 结果与分析 |
6.3.1 八倍体小偃麦TAF46与7J(7A)代换系的细胞学鉴定 |
6.3.2 7J染色体不同变异类型的细胞学鉴定 |
6.3.3 7J染色体不同变异类型的的分子标记分析 |
6.3.4 7J染色体苗期胚芽鞘紫色基因的定位 |
6.3.5 7J染色体特定区段分子标记开发 |
6.4 讨论 |
6.4.1 胚芽鞘色素基因研究价值 |
6.4.2 胚芽鞘色素基因与籽粒色素基因之间的关系 |
6.5 本章小结 |
第七章 全文总结与展望 |
7.1 全文总结 |
7.2 后续工作展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
附图 |
攻读博士学位期间取得的成果 |
(7)长穗偃麦草染色体导入小麦背景的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩写说明 |
第一章 文献综述 |
1 引言 |
2 小麦常见野生近缘种 |
2.1 长穗偃麦草的优良特性及其基因定位 |
2.2 长穗偃麦草在小麦抗赤霉病中的研究 |
3 小麦野生近缘种在其遗传改良中的应用 |
3.1 部分双二倍体或双二倍体 |
3.2 异附加系 |
3.3 异代换系 |
3.4 异源易位系 |
4 小麦中外源遗传物质的检测 |
4.1 细胞学鉴定 |
4.2 分子标记检测 |
4.3 原位杂交 |
5 本研究的主要内容、目的和意义 |
5.1 硬粒小麦-长穗偃麦草单体附加系的选育及其染色体传递特性的研究 |
5.2 普通小麦-长穗偃麦草7EL抗赤霉病小片段易位系创建 |
第二章 硬粒小麦-长穗偃麦草2E、4E单体附加系及其E染色体传递 |
1 前言 |
2 材料与方法 |
2.1 植物材料 |
2.2 实验方法 |
3 结果与分析 |
3.1 染色体分子标记鉴定外源染色体 |
3.2 原位杂交分析 |
3.3 正反杂交分析 |
3.4 减数分裂中染色体分离和原位杂交分析 |
4 讨论 |
4.1 外源染色体简便快捷的鉴定方法 |
4.2 长穗偃麦草外源染色体在小麦背景中的传递 |
第三章 普通小麦-长穗偃麦草7EL抗赤霉病小片段易位系创建 |
1 前言 |
2 材料与方法 |
2.1 植物材料 |
2.2 实验方法 |
3 结果与分析 |
3.1 原位杂交分析 |
3.2 7EL染色体的特异分子标记的物理定位 |
3.3 赤霉病鉴定结果 |
4 讨论 |
4.1 电离辐射在创建小片段易位系中的应用 |
4.2 染色体7EL分子标记物理图谱与赤霉病抗性基因 |
结论与展望 |
1 结论 |
2 展望 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
硕士期间发表的文章 |
(8)一整套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的选育与鉴定(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一部分 文献综述 |
1 小麦族植物及其染色体组分类 |
2 小麦的近缘植物及其利用 |
2.1 小麦的基因源 |
2.2 近缘植物有益基因向普通小麦的转移 |
2.3 小麦近缘植物在基因组研究中的应用 |
3 普通小麦背景中外源染色体(质)的鉴定标记 |
3.1 形态学标记 |
3.2 生化标记 |
3.3 细胞遗传学标记 |
3.4 DNA分子标记 |
3.4.1 RFLP标记 |
3.4.2 SSR标记 |
3.4.3 EST标记 |
3.4.4 STS标记 |
3.4.5 SLAF-seq标记 |
4 纤毛鹅观草的利用价值及研究现状 |
第二部分 研究报告 |
技术路线 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 植物材料 |
1.1.2 原位杂交探针 |
1.2 细胞遗传学实验方法 |
1.2.1 根尖细胞有丝分裂中期染色体制片 |
1.2.2 花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ染色体制片 |
1.2.3 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH) |
1.3 分子标记实验方法 |
1.3.1 植物总基因组DNA的提取(SDS法) |
1.3.2 PCR反应 |
1.4 抗病性鉴定方法 |
1.4.1 赤霉病抗性鉴定 |
1.4.2 白粉病抗性鉴定 |
1.4.3 黄花叶病抗性鉴定 |
1.4.4 叶锈病抗性鉴定 |
1.5 农艺性状调查方法 |
2 结果与分析 |
2.1 套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的配套选育 |
2.1.1 涉及纤毛鹅观草2Y~c染色体二体异附加系的选育和鉴定 |
2.1.2 涉及纤毛鹅观草3Y~c染色体二体异附加系的选育和鉴定 |
2.1.3 涉及纤毛鹅观草4S~c和4Y~c染色体二体异附加系的选育和鉴定 |
2.1.4 涉及纤毛鹅观草5S~c染色体二体异附加系的选育和鉴定 |
2.1.5 涉及纤毛鹅观草6S~c和6Y~c染色体二体异附加系的选育和鉴定 |
2.1.6 一套普通小麦-纤毛鹅观草异附加系的GISH/FISH分析 |
2.2 纤毛鹅观草染色体特异分子标记的筛选及利用 |
2.2.1 纤毛鹅观草染色体特异分子标记的筛选 |
2.2.2 纤毛鹅观草各条染色体专化标记的筛选和利用 |
2.3 普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的性状鉴定 |
2.3.1 普通小麦-纤毛鹅观草异附加系的赤霉病抗性鉴定 |
2.3.2 普通小麦-纤毛鹅观草异附加系的白粉病抗性鉴定 |
2.3.3 普通小麦-纤毛鹅观草异附加系的黄花叶病抗性鉴定 |
2.3.4 普通小麦-纤毛鹅观草异附加系的锈病抗性鉴定 |
2.3.5 普通小麦-纤毛鹅观草异染色体系的农艺性状调查 |
3 讨论 |
3.1 普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的配套选育及其意义 |
3.2 建立快速、准确识别纤毛鹅观草染色体或片段的方法 |
3.2.1 利用顺次GISH-FISH技术识别纤毛鹅观草染色体 |
3.2.2 筛选纤毛鹅观草各条染色体的专化分子标记 |
3.3 纤毛鹅观草有益基因的进一步挖掘和利用 |
全文结论 |
创新点及不足之处 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
(9)小麦—黑麦—偃麦草三属杂种种质创制及分子细胞遗传学研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
缩写说明 |
第一章 文献综述 |
引言 |
1 小麦族概况 |
1.1 小麦属的分类 |
1.2 小麦的近缘种属 |
2 小黑麦概况 |
2.1 人工创造小黑麦新物种 |
2.2 小黑麦的类型 |
2.3 小黑麦的特性 |
2.4 小黑麦育种进展 |
3 小麦近缘野生物种在远缘杂交中的应用 |
3.1 属间杂交与外源基因转移 |
3.2 胚拯救技术在远缘杂交中的应用 |
3.3 小麦多属杂种研究概况 |
3.4 多属杂种的创造途径 |
3.5 多属杂种的利用价值 |
4 长穗偃麦草特性及其在远缘杂交中的应用 |
4.1 长穗偃麦草染色体组构成 |
4.2 长穗偃麦草的抗病性 |
4.3 长穗偃麦在小麦遗传改良中的应用 |
5 小麦外源遗传物质的检测 |
5.1 形态学 |
5.2 细胞学 |
5.3 原位杂交 |
5.4 分子标记 |
6 本研究的目的意义及主要内容 |
6.1 本研究的目的和意义 |
6.2 研究内容 |
第二章 小麦-黑麦-偃麦草三属杂种的选育 |
1 引言 |
2 材料与方法 |
2.1 植物材料 |
2.2 实验方法 |
3 结果与分析 |
3.1 胚拯救技术获得小麦-黑麦-偃麦草三属F_1杂种 |
3.2 小麦-黑麦-偃麦草三属F_1杂种细胞学鉴定 |
3.3 小麦-黑麦-偃麦草三属F_1杂种农艺特征 |
3.4 小麦-黑麦-偃麦草三属杂种后代染色体数目分离 |
3.5 小麦-黑麦-偃麦草三属杂种自交后代农艺性状 |
4 讨论 |
4.1 小麦远缘杂交中的胚拯救技术 |
4.2 三属杂种染色体组成 |
第三章 基于SLAF-seq技术发展黑麦和长穗偃麦草染色体特异分子标记 |
1 引言 |
2 材料与方法 |
2.1 植物材料 |
2.2 实验方法 |
3 结果与分析 |
3.1 SLAF-seq序列的获得及筛选 |
3.2 发展黑麦染色体特异分子标记 |
3.3 发展长穗偃麦草染色体特异分子标记 |
4 讨论 |
4.1 SLAF-seq技术在分子标记开发上的优势 |
4.2 SLAF-seq技术发展染色体特异分子标记的应用 |
第四章 小麦-黑麦-偃麦草三属杂种染色体鉴定 |
1 引言 |
2 材料与方法 |
2.1 实验材料 |
2.2 实验方法 |
3 结果与分析 |
3.1 分子标记鉴定染色体组成 |
3.2 基因组原位杂交(GISH)鉴定染色体组成 |
3.4 农艺性状 |
4 讨论 |
4.1 染色体组成鉴定的准确性 |
4.2 黑麦、长穗偃麦草染色体在三属杂种中的分布 |
4.3 三属杂种的应用价值 |
第五章 优异三属杂种的染色体组成及抗病性鉴定 |
1 引言 |
2 材料与方法 |
2.1 实验材料 |
2.2 实验方法 |
3 结果与分析 |
3.1 原位杂交鉴定三属杂种RE21和RE62的染色体组成 |
3.2 染色体标记鉴定三属杂种RE21和RE62的染色体组成 |
3.3 赤霉病抗性鉴定 |
3.4 叶锈病和Ug99抗性鉴定 |
3.6 农艺性状特征 |
4 讨论 |
4.1 多重技术相结合的选育方法 |
4.2 抗性及部分农艺性状的分析 |
4.3 三属杂种的价值 |
第六章 主要结论和创新点 |
1 主要结论 |
1.1 小麦-黑麦-偃麦草三属杂种的获得及染色体分离 |
1.2 黑麦、长穗偃麦草各染色体特异分子标记筛选 |
1.3 小麦-黑麦-偃麦草三属杂种的染色体组成 |
1.4 获得两个抗病性不同的小麦-黑麦-偃麦草三属杂种材料 |
2 主要创新点 |
3 本研究的不足之处 |
4 下一步计划 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
发表文章和申请专利 |
(10)小麦中未减数配子介导的异源多倍体化的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 植物多倍体化 |
1.2 植物中未减数配子的发生 |
1.2.1 未减数配子的发现和产生类型 |
1.2.2 小麦的起源与未减数配子的发生 |
1.2.3 小麦族中进行未减数分裂的基因型 |
1.2.4 小麦中未减数配子形成的遗传调控 |
1.3 异源多倍体小麦的染色体工程 |
1.3.1 小麦细胞遗传学材料 |
1.3.2 小麦染色体检测技术的发展 |
1.4 伴随人工合成异源多倍体小麦的基因组进化 |
1.4.1 人工合成四倍体/六倍体小麦 |
1.4.2 小黑麦的基因组变异 |
1.5 研究方案 |
1.5.1 选题目的及意义 |
1.5.2 研究内容和方案 |
1.5.3 技术路线 |
第二章 四倍体小麦DR147重双端体的遗传特性研究 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 植物材料 |
2.2.2 质粒 |
2.2.3 根尖染色体有丝分裂和花粉母细胞减数分裂分析 |
2.2.4 荧光原位杂交(FISH) |
2.2.5 分子标记析 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 四倍体小麦DR147重双端体的选育和鉴定 |
2.3.2 重双端体选育过程中带有 5B端体染色体的配子表现优先传递 |
2.3.3 6BL端体带有的部分显性芒长抑制位点B2决定了dDt6B的芒长变异 |
2.3.4 dDt6B中 6BL和 6BS端体特异的保留了部分CS的遗传背景 |
2.3.5 dDt6B中 6BL端体上B2的定位 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三章 DR147重双端体与黑麦杂种F_1的减数分裂研究 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 植物材料 |
3.2.2 质粒 |
3.2.3 胚拯救 |
3.2.4 根尖体细胞染色体有丝分裂和幼穗花粉母细胞减数分裂分析 |
3.2.5 荧光原位杂交(FISH)和基因组原位杂交(GISH) |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 四倍体小麦和黑麦杂种F_1的获得和鉴定 |
3.3.2 四倍体小麦DR147的减数分裂分析 |
3.3.3 端体染色体对四倍体小麦和黑麦杂种F_1减数分裂的影响 |
3.3.4 四倍体小麦和黑麦杂种F_1未减数分裂的研究 |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
第四章 利用未减数配子合成的六倍体小麦中染色体和微卫星的变异研究 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 植物材料 |
4.2.2 表型和抗病性鉴定 |
4.2.3 根尖体细胞染色体有丝分裂和幼穗花粉母细胞减数分裂分析 |
4.2.4 荧光原位杂交(FISH)和基因组原位杂交(GISH) |
4.2.5 微卫星分子标记分析 |
4.2.6 克隆和测序验证 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 利用未减数配子合成人工六倍体小麦 |
4.3.2 NA0928早期世代表现出染色体数目和结构的变异 |
4.3.3 NA0928后代中微卫星分析揭示了DNA重复序列的变异 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
第五章 普通小麦和黑麦杂种后代中D染色体组完全消除的研究 |
5.1 引言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 植物材料 |
5.2.2 荧光原位杂交(FISH)和基因组原位杂交(GISH) |
5.2.3 幼穗减数分裂观察 |
5.2.4 表型和抗病性鉴定 |
5.2.5 籽粒贮藏蛋白分析 |
5.3 结果与分析 |
5.3.1 六倍体小黑麦N9116H和N9116M的表型和细胞学分析 |
5.3.2 N9116H和N9116M连续的FISH和GISH核型分析 |
5.3.3 N9116H和N9116M中贮藏蛋白的变异分析 |
5.4 讨论 |
5.4.1 小麦和黑麦杂种后代中D基因组的不稳定性 |
5.4.2 生物学性状的差异可能来自于小黑麦的基因组动荡 |
5.4.3 由普通小麦和黑麦杂交后代的六倍体小黑麦的价值 |
5.5 小结 |
第六章 总结 |
6.1 主要结论 |
6.2 本研究的创新点 |
6.3 研究展望 |
参考文献 |
附录 |
缩略词 |
致谢 |
作者简介 |
四、硬粒小麦-簇毛麦双二倍体与普通小麦杂种F_1的花粉母细胞减数分裂行为的研究(论文参考文献)
- [1]5份小麦-华山新麦草衍生后代的分子细胞遗传学鉴定及重要农艺性状评价[D]. 李家创. 西北农林科技大学, 2021
- [2]普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生后代的分子细胞遗传学研究及特异标记开发[D]. 王艳珍. 西北农林科技大学, 2021
- [3]硬粒小麦-中间偃麦草杂种后代的分子细胞遗传学研究[D]. 祁晓月. 哈尔滨师范大学, 2021(08)
- [4]江苏省植物细胞遗传学研究回顾与展望[J]. 王海燕,龚志云,蒋甲福,周宝良,娄群峰,曹清河,席梦利,陈佩度,顾铭洪,张天真,陈发棣,陈劲枫,李宗芸,王秀娥. 遗传, 2021(05)
- [5]簇毛麦6V#4S特异标记连锁图谱建立与小麦染色体新易位系创制[D]. 马晓兰. 中国农业科学院, 2020(01)
- [6]小麦-茸毛偃麦草新型渐渗系的分子细胞遗传学解析[D]. 李建波. 电子科技大学, 2020(07)
- [7]长穗偃麦草染色体导入小麦背景的研究[D]. 罗贤磊. 扬州大学, 2019
- [8]一整套普通小麦-纤毛鹅观草二体异附加系的选育与鉴定[D]. 孔令娜. 南京农业大学, 2017(07)
- [9]小麦—黑麦—偃麦草三属杂种种质创制及分子细胞遗传学研究[D]. 戴毅. 扬州大学, 2017(12)
- [10]小麦中未减数配子介导的异源多倍体化的研究[D]. 李浩. 西北农林科技大学, 2016(09)