重组人OP-1原核表达促进拔牙创面愈合的实验研究

一、原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究（论文文献综述）

刘晓莉^[1]（2009）在《正畸牙移动过程中骨形成蛋白-7在牙周组织内的表达》文中研究表明目的:通过动物实验检测正畸力作用下兔牙周组织中骨形成蛋白-7（Bone Morphogenetic Protein-7, BMP-7）的表达与分布,探讨BMP-7与正畸牙齿牙周组织改建的相关性及意义,进一步了解正畸牙齿移动的变化规律,为正畸临床工作提供理论依据。方法:于兔上颌左侧第一磨牙与上颌切牙之间安装正畸用镍钛拉簧,使磨牙向近中移动,于加力后第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21天后取材分别进行HE和免疫组化染色,图像分析。结果:通过免疫组织化学染色的方法,观察到:①在对照组中,BMP-7阳性染色很弱,主要分布于牙周膜及其周围组织细胞的胞浆中,成骨细胞的胞浆和成纤维细胞的胞浆均呈阳性染色,破骨细胞的阳性染色相对更弱。②在实验加力组,BMP-7阳性染色在张力侧比压力侧要强,尤其是临近牙槽骨的成纤维细胞和成骨细胞的胞浆染色最强。牙周膜的中间区域染色较弱,压力侧破骨细胞染色也较强,但与成骨细胞相比较弱。③张力侧BMP-7的表达在加力7天组达到高峰,之后表达水平逐渐下降,到19天、21天组时表达水平与空白对照组相近;而压力侧则是在9天组达到高峰,到21天组达到空白对照组水平。结论:本实验揭示了正畸牙移动过程中BMP-7在牙周组织内的分布和表达的变化,证明BMP-7参与了正畸过程中的骨改建,对牙周组织的改建有一定的调节作用。

王旭霞^[2]（2008）在《膜引导结合Adv-BMP-2局部基因治疗老年性骨缺损的实验研究》文中进行了进一步梳理目的探讨在老年骨再生功能低下时应用膜引导结合Adv-BMP-2局部基因治疗对骨缺损修复的促进作用,以寻找治疗老年性骨缺损的有效方法。1.成骨细胞的提取、体外培养和鉴定;Adv-BMP-2的扩增、纯化、滴度测定;Adv-BMP-2对成骨细胞生物学行为的影响。2.TNF-α对于成骨细胞生长的影响和对BMP受体表达的调控作用。3.手术建立大鼠去势后骨质疏松牙槽骨缺损动物模型,为进一步的动物实验奠定基础。4.应用体外法（ex vivo）进行BMP-2基因转移,研究Adv-BMP-2对骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复的成骨效果。5.异体冷冻骨膜与e-PTFE膜复合红骨髓对颌骨缺损成骨性能的比较分析。6.通过老年大鼠骨质疏松骨缺损动物模型,采用体内法（in vivo）进行BMP-2基因转移结合膜引导修复老年性骨缺损并与其他不同植骨材料进行比较,以寻找治疗老年性骨缺损的有效方法。方法1.成骨细胞的提取、体外培养和鉴定。原代成骨细胞来自出生1周Wistar乳鼠,进行成骨细胞培养,通过形态学观察、ALP染色、体外矿化实验,鉴定成骨细胞是否培养成功。Adv-BMP-2的扩增、纯化、滴度测定。观察成骨细胞转染Adv-BMP-2后生物学行为的变化。2.采用MTT及PNPP法检测不同浓度TNF-α对于成骨细胞增殖和分化的影响。在保证细胞量相等的前提下,利用RT-PCR技术测定不同浓度TNF-α对于成骨细胞BMP受体表达的调控作用。3.建立大鼠骨质疏松牙槽骨缺损动物模型并通过各种检测方法证实模型建立。40只3月龄雌性大鼠随机分为4组,A组:S0组;B组:0VX组;C组:BD组;D组:0VX+BD组。术后8周、12周测定大鼠体重变化;血清中ALP、Ca、P含量及子宫重量系数变化;用双能X线吸收法（DEXA）行颌骨密度和骨矿含量测定。4.20只健康雌性Wistar大鼠,随机分为2组。实验组:A组为Adv-BMP-2转染成骨细胞/CS组（A/C组）;对照组:B组为去势牙槽骨缺损对照组（OB组）。分别在第8周、第12周处死动物,获取标本并行大体观察、X线检查、组织学检查。5.将健康Wistar大鼠断颈法处死后取颅骨顶骨骨膜制备异体冷冻骨膜（variant deepfreeze periosteum,VDP）备用。24只成年Wistar大鼠随机分为3组。于下颌骨升支部制造约0.5cm×0.5cm的骨缺损。A组:SO组:B组:e-PTFE/RBM组;C组:VDP/RBM组。分别在第4周、第8周处死动物,获取标本行大体观察、X线检查、组织学检查。观察不同膜引导成骨性能的效果。6.40只雌性,老年Wistar大鼠22月龄（体重330±32g）,SPF级（无特定病原体动物）,随机将40只Wistar大鼠分为ABCDE五组:A组为SO组;B组为VDP/Adv-BMP-2/CS组;C组为VDP/Perioglas组;D组为VDP/HPPA组;E组为VDP/Adv- GFP/CS组。于下颌骨升支部制造约0.5cm×0.5cm的的全厚下颌骨缺损模型,BCD实验各组分别植入不同材料。A组为对照组未植入任何材料,作为空白对照。分别于术后第8周、第12周处死动物。获取标本并行大体观察、X线检查、组织学检查、免疫组化检查。E组行体内绿色荧光蛋白成骨示踪,观察各组不同时期的新生骨量并进行统计学比较。结果1.成骨细胞体外培养形态观察:成骨细胞初期为多角形,胞核呈椭圆形;培养1周,细胞为近立方状,体积小、核圆。碱性磷酸酶（ALP）活性检测:ALP活性是成骨细胞分化成熟的重要标志之一。体外培养扩增的细胞ALP染色和钙化实验均为阳性,证实培养的细胞具有典型的成熟成骨细胞的特征。Adv-BMP-2转染后可提高成骨细胞增殖功能和分化功能。2.本结果显示当TNF-α浓度大于50ng/ml时对于成骨细胞增殖就有明显的抑制作用。当TNF-α的浓度大于5ng/ml时对于成骨细胞分化有明显抑制作用。不同浓度TNF-α均可以抑制BMP-IA和BMPR-Ⅱ基因的表达,但对BMP-IB却有促进作用。3.通过手术建立动物模型并进行各种指标监测显示,手术后12周已成功地制备了大鼠骨质疏松牙槽骨缺损动物模型。为进一步的动物实验奠定了基础。4.应用体外法（ex vivo）进行BMP-2基因转移,并进行大体观察、X线检查和组织学检查后发现:Adv-BMP-2对于骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复有明显的促进作用。5.VDP及e-PTFE不同引导膜修复大鼠下颌骨缺损并与空白对照组比较。术后8周结果显示:VDP及e-PTFE膜组都有新骨形成并遍布整个骨缺损区。而对照组显示:除边缘有少量骨组织外骨缺损区充满纤维结缔组织。VDP及e-PTFE膜都可引导骨缺损形成骨组织。6.采用体内法（in vivo）进行BMP-2基因转移结合膜引导修复老年性骨缺损并与其他不同植骨材料进行比较。结果发现不同种类的生物材料直接影响界面区早期的组织反应,膜引导结合Adv-BMP-2比其它材料较早地引导了新骨形成。6.1.X线观察:术后8周对照A组骨缺损区界线清楚,缺损边缘可见少量高密度影。实验B组、C组、D组骨缺损区域均有呈絮状或云雾状密度增高影,材料与骨界限清楚,各组差异不明显。术后12周:对照组仍有约2mm左右的骨缺损。B组缺损修复区骨密度最高,新生骨组织覆盖缺损,缺损处密度与周围骨质基本相似,交界已模糊不清。C组、D组缺损也己完全修复,交界线也模糊不清,但缺损处密度略低于周围骨组织。6.2.组织学观察:术后8周对照A组骨缺损区周边可见成骨细胞及少量成骨,骨缺损中心区可见大量纤维结缔组织形成。实验B组、C组、D组有不同程度成骨。B组移植骨周边诱导骨明显增加,成骨细胞增生活跃;新骨自四周向中心堆积,钙盐沉积增多。C组可见部分区域Perioglas白色透明颗粒样成骨材料基本溶解,周围留下一些颗粒溶解的空腔,在其周围形成许多基骨。仅少部分材料周围有薄层的结缔组织,在颗粒间隙可见有明显的骨母细胞、骨细胞、骨样组织。D组所有材料周围均有大量类骨质生成,但类骨质的钙化程度以及基质中细胞形态都有差异。材料已牢固地与骨组织连成一片,新骨组织包绕材料,新生骨改建明显。术后12周对照A组骨缺损区边缘有少量新骨沉积,腔内被纤维组织充满。成骨细胞和类骨质仍局限在两端,缺损中央被纤维结缔组织充填,血管少,未见成骨现象。B组缺损处几乎被新生骨组织充填,仅存少许纤维组织,周边可见骨小梁形成。C组白骨缺损中心到边缘区域的新生骨均由骨桥连结起来,Perioglas降解后留下的空腔已完全被新生骨取代。骨缺损部位骨样组织、骨组织进一步增多。D组HPPA植入后材料基本由骨组织覆盖,新骨形成明显,钙化程度高,晶界模糊。6.3.统计分析结果:术后8周B组优于C组（P＜0.05）和D组（P＜0.05）;C组与D组两组差异无显着性意义（P＞0.05）。术后12周B组、C组、D组明显优于A组（P＜0.01）。6.4.大鼠体内绿色荧光蛋白成骨示踪:E组移植术后2周冰冻切片和连续石蜡切片,在荧光显微镜下观察,均可见移植部位呈发射绿色荧光的网状支架材料并可见成骨细胞。移植后4周冰冻切片和连续石蜡切片,在荧光显微镜下观察,仍可见移植部位呈发射绿色荧光的网状支架材料及成骨细胞。结论1.体外实验证实:Adv-BMP2对成骨细胞增殖功能和分化功能有明显促进作用。为后续BMP-2基因治疗的应用研究奠定了基础。2.当TNF-α浓度大于50ng/ml时对于成骨细胞增殖就有明显的抑制作用。当TNF-α的浓度大于5ng/ml时对于成骨细胞分化有明显抑制作用。不同浓度TNF-α均可以抑制BMP-IA和BMPR-Ⅱ基因的表达,但对BMP-IB却有促进作用。总体说来,TNF-α对于BMPR复合体起抑制作用。3.可以手术制备大鼠骨质疏松牙槽骨缺损动物模型,为进一步的动物实验奠定基础。4.体外法（ex vivo）进行BMP-2基因转移修复骨质疏松牙槽骨缺损,Adv-BMP-2对于骨质疏松大鼠牙槽骨缺损修复有明显的促进作用。5.VDP及e-PTFE不同引导膜都可引导大鼠颌骨缺损骨组织修复。6.体内法（in vivo）进行BMP-2基因转移结合膜引导修复老年大鼠骨缺损比其它材料较早地引导了新骨形成,是一种理想的骨组织替代材料。特别是对老年骨再生能力低下骨缺损的修复有明显的促进作用。

卞翠荣,肖水清,汲平^[3]（2007）在《原核表达重组人骨形态发生蛋白-7对牙槽骨修复再生的实验研究》文中进行了进一步梳理目的研究原核表达重组人骨形态发生蛋白-7（rhBMP-7）对牙槽骨修复再生的影响。方法采用新西兰白兔建立动物模型,以明胶海绵作为载体,将大肠杆菌原核表达的rhBMP-7与之复合后植入即刻拔除牙齿的牙槽窝内进行干预治疗,术后2、4、8及12周处死动物,取标本进行大体观察、扫描电镜分析、碱性磷酸酶（ALP）活性测定。结果大体观察结果显示,实验组和对照组牙槽嵴高度的吸收差异有显着性;扫描电镜观测显示,实验组的骨创愈合比对照组大约提前4～6周;ALP活性测定显示实验组均明显高于对照组,其差异有统计学意义（P<0.05）。结论原核表达rhBMP-7具有促进新骨修复再生、防止牙槽骨吸收的作用。

孙杰,卞翠荣,王世立,韩金祥,张维东,李国菊^[4]（2007）在《重组人骨形态发生蛋白-7复合体对牙槽骨再生的影响》文中研究说明目的观察基因重组人骨形态发生蛋白-7（rhBMP-7）与明胶海绵的复合体对犬牙槽骨再生的影响。方法犬拔牙创内植入rhBMP-7与明胶海绵的复合体,以自然愈合拔牙创为对照。于术后2、4、8周分别将犬处死,取拔牙创处牙槽骨标本,行X线和组织学切片检查,观察成骨情况及牙槽骨萎缩情况。结果X线及组织学切片显示实验侧成骨速度及成骨质量明显优于对照侧。结论rhBMP-7与明胶海绵复合体是一种可促进牙槽骨再生的新型生物复合材料。

肖水清,卞翠荣^[5]（2006）在《原核表达的重组人骨形态发生蛋白7增高牙槽嵴的实验（英文）》文中认为背景:牙齿缺失后,牙槽骨内成骨与破骨的动态平衡被打破,牙槽嵴呈现出不可逆转的骨吸收,其后果是大量的牙槽骨丢失;骨形态发生蛋白在骨及牙齿的生长发育和创伤修复中发挥重要作用。目的:观察原核表达的重组人骨形态发生蛋白7对增强牙槽嵴的新骨形成、预防牙槽嵴吸收的作用。设计:对照实验。单位:济南市口腔医院正畸科,山东省医学科学院。材料:实验于2003-06/2004-12在山东省医学科学院完成,采用新西兰大白兔28只,雌雄不限,体质量平均2kg。方法:采用大白兔建立动物拔牙创模型,将大白兔分别拔除左、右下门牙,将骨形态发生蛋白7复合载体2块40μg植入右下门牙（为实验组）,仅含磷酸盐缓冲液的空载体2块40μg植入左下门牙（为对照组）,术后2,4,8及12周处死动物,取标本进行扫描电镜分析、钙含量及碱性磷酸酶活性测定。主要观察指标:①扫描电镜分析结果。②碱性磷酸酶活性及钙含量。结果:①电镜照片结果:实验组的骨创愈合比对照组提前4～6周。②碱性磷酸酶活性:实验组均明显高于对照组[2周:（38.191±5.384）,（19.821±2.084）μkat/g;4周:（160.815±9.669）,（126.709±1.634）μkat/g;8周:（378.892±13.086）,（225.212±1.884）μkat/g,P<0.01]。③钙含量:实验组均明显高于对照组[2周:（5.592±0.110）,（0.913±0.064）mg/g;4周:（8.654±0.177）,（1.702±0.071）mg/g;8周:（25.326±0.287）,（5.980±0.145）mg/g,P<0.01]。结论:原核表达重组人骨形态发生蛋白7具有良好的增高牙槽嵴、促进拔牙创愈合的作用。

肖水清,张体勇,田华^[6]（2006）在《重组人骨形成蛋白牙槽嵴内诱导成骨的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨原核表达重组人骨形成蛋白-7牙槽嵴内诱导成骨的作用效果。方法:拔除大白兔的切牙建立动物模型,以明胶海绵作为载体,将原核表达的重组人骨形成蛋白-7与之复合后植入即刻拔除牙齿的牙槽窝内进行干预治疗,通过扫描电镜观察及钙含量测定,探讨原核表达重组人骨形成蛋白-7牙槽嵴内诱导成骨的作用效果。结果:扫描电镜观察显示:实验组的骨创愈合比对照组大约提前46周;钙含量测定显示实验组明显高于对照组,差异有统计学意义。结论:重组人骨形成蛋白-7具有良好的诱导牙槽嵴内成骨的效果。

肖水清,卞翠荣,刘萍^[7]（2004）在《原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究》文中研究说明目的 :检测原核表达基因工程重组人OP -1 （rhop-1）促进拔牙创愈合 ,减少牙槽嵴吸收的的效能。方法 :采用大白兔建立拔牙创的动物模型 ,以明胶海绵作为载体 ,将大肠杆菌原核表达的重组人OP -1与之复合后植入即刻拔除牙齿的牙槽窝内进行干预治疗 ,通过观察其组织学改变、钙含量及碱性磷酸酶活性测定的变化 ,探讨原核表达的基因工程重组产品rhOP -1是否促进拔牙创的愈合修复。结果 :大体观察结果显示 :两组牙槽嵴高度的吸收差异有显着性 ;组织学HE切片显示 :实验组的骨创愈合比对照组大约提前4～6周;碱性磷酸酶 （ALP）活性及钙含量测定均显示实验组均明显高于对照组 ,差异有统计学意义。结论 :原核表达基因工程重组人骨形态发生蛋白具有良好的促进骨创愈合、减少或防止牙槽骨吸收的作用

二、原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究（论文提纲范文）

（1）正畸牙移动过程中骨形成蛋白-7在牙周组织内的表达（论文提纲范文）

（2）膜引导结合Adv-BMP-2局部基因治疗老年性骨缺损的实验研究（论文提纲范文）

（6）重组人骨形成蛋白牙槽嵴内诱导成骨的实验研究（论文提纲范文）

（7）原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究（论文提纲范文）

四、原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究（论文参考文献）

• [1]正畸牙移动过程中骨形成蛋白-7在牙周组织内的表达[D]. 刘晓莉. 大连医科大学, 2009(02)
• [2]膜引导结合Adv-BMP-2局部基因治疗老年性骨缺损的实验研究[D]. 王旭霞. 山东大学, 2008(12)
• [3]原核表达重组人骨形态发生蛋白-7对牙槽骨修复再生的实验研究[J]. 卞翠荣,肖水清,汲平. 华西口腔医学杂志, 2007(04)
• [4]重组人骨形态发生蛋白-7复合体对牙槽骨再生的影响[J]. 孙杰,卞翠荣,王世立,韩金祥,张维东,李国菊. 中国生物制品学杂志, 2007(04)
• [5]原核表达的重组人骨形态发生蛋白7增高牙槽嵴的实验（英文）[J]. 肖水清,卞翠荣. 中国临床康复, 2006(13)
• [6]重组人骨形成蛋白牙槽嵴内诱导成骨的实验研究[J]. 肖水清,张体勇,田华. 口腔医学研究, 2006(01)
• [7]原核表达重组人OP-1促进拔牙创愈合的实验研究[J]. 肖水清,卞翠荣,刘萍. 中国口腔种植学杂志, 2004(04)

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